صفحه 1
صفحه 2
صفحه 3
صفحه 4
صفحه 5
صفحه 6
ص 7
ص 8
صفحه 9
ص 10
ص 11
ص 12
بین المللی
روشها برای تعیین خالص سازی
نسخه رسمی
و انتشار خانه شخصی رایانه های شخصی Moscow
UDC 631.1: 006.354 Pear HI9
استاندارد بین المللی
محصولات شیر \u200b\u200bو لبنی روشهای تعیین پاستوریزاسیون
شیر و فراورده های شیر.
روشهای تعیین پاستوریزاسیون
ISS 67.100.10_
معرفی لاتا 01.01.76
این استاندارد در مورد ارزیابی اثربخشی پاستوریزه کردن مواد اولیه که از آنها گرفته می شود ، در مورد شیر پاستوریزه ، خامه ، شیر مایع ، آب پنیر کاربرد دارد و روش هایی را برای تعیین پاستوریزاسیون و همچنین پنیر کلوچه ، خامه ترش ، کره ، نوشیدنی های شیرین و سایر محصولات لبنی تعیین می کند.
1. نمونه گیری
1.1. نمونه برداری از شیر و لبنیات مطابق با GOST 26809 و GOST 13928 انجام می شود.
2- روشهاي تعيين پراكسيداز
2.1a پراکسیداز در دمای پاستوریزاسیون از ns زیر 80 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری 30-20 ثانیه غیرفعال می شود.
(علاوه بر این معرفی شده است. اصلاح شماره 2).
الف. روش تعیین پراکسید توسط واکنش با هیدروکلراید رافنیلن دی آمین
2.1. جوهر روش
این روش براساس تجزیه پراکسید هیدروژن توسط آنزیم پراکسیداز است. موجود در شیر و محصولات مادر.
اکسیژن فعال آزاد شده در هنگام تجزیه پراکسید هیدروژن توسط پارافیلن آمینین اکسید می شود و یک ترکیب آبی تشکیل می دهد.
2.2. تجهیزات ، مواد و معرفها: تعادل آزمایشگاهی تحلیلی. مقیاس آزمایشگاه فنی لوله های آزمایش مطابق با GOST 23932؛
پیپت ها با ظرفیت 2 و 5 سانتی متر مطابق با GOST 29169؛
پیپت هایی با ظرفیت 5 یا 10 سانتی متر * با قیمت فارغ التحصیلی 1/0 سانتی متر مطابق با GOST 29169: قطره ای از شیشه تیره یا پوشیده از لاک سیاه فلاسک های حجمی با ظرفیت 250 و 500 سانتی متر "مطابق با GOST 1770؛ فلاسک های مخروطی با ظرفیت 250 سانتی متر "مطابق با GOST 1770؛ حمام آب با یک دستگاه گرمایشی؛
هیدروکلراید paraphenylenediamine ، محلول آبی 2٪. محلول ناپایدار است ، باید در یک بطری شیشه ای تیره با یک درپوش محکم بسته ، در یک مکان تاریک و خنک نگهداری شود. اسید سیتریک کریستالی اما GOST 3652 ، x. ساعت یا ساعت؛ اسید سولفوریک مطابق با GOST 4204. x ح) متمرکز؛ پرمنگنات پتاسیم مطابق با GOST 20490.0.1 n. راه حل؛ پراکسید پزشکی هیدروژن مطابق با GOST 10929. محلول 0.5٪؛ آب مقطر مطابق با GOST 6709؛
نسخه رسمی
فسفات سدیم کریستال را مطابق با GOST 11773 از بین برد. x ساعت یا چند ساعت
چاپ مجدد ممنوع است
انتشارات استاندارد. 1973 © خانه انتشارات استاندارد IPK. 2003
2.3 آماده شدن برای آپاچی چو
2.3.1. آزمایش مناسب بودن محلول 2٪ هیدروکلراید پارافن / اندیایین
در هنگام استفاده از محلول 2٪ هیدروکلراید پارافیلیلن دی آمین. بیش از 1-2 روز ذخیره می شود ، مناسب بودن آن باید بررسی شود. برای این کار ، 5 سانتی متر شیر را درون یک لوله آزمایش قرار داده ، خنک کنید ، 2.5 سانتی متر از مخلوط بافر را اضافه کنید ، مخلوط کنید و به مدت 3-5 دقیقه در حمام آب با دمای آب (2 35 35) * قرار دهید. سپس 6 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ و 3 قطره از محلول هیدروکلراید paraphenylenediamine اضافه کنید. دوباره مخلوط کرده و در حمام آب قرار دهید. ظاهر یک رنگ آبی تیره یا خاکستری مایل به آبی نشانگر نامناسب بودن محلول است.
2.3.2. آماده بافر
97 گرم دی بیسیک سدیم فسفات و 0.65 گرم اسید سیتریک ، که با خطای بیش از 0/0002 گرم وزن نشده است ، در یک فلاسک حجمی 500 سانتی متر ، در آب مقطر حل می شود ، خرما را به علامت زده و هم بزنید. مخلوط بافر باید در یک بطری شیشه ای تیره و با یک محکم بسته نگه داشته شود.
2.3.3. تعیین پراکسید هیدروژن در یک محلول غلیظ
3-4 گرم پراکسید هیدروژن غلیظ ، وزن آن با دقت بیش از 0.01 گرم ، بدون از بین رفتن به یک کاتبا اندازه گیری با ظرفیت 250 سانتی متر منتقل می شود "، با آب با مارک تنظیم شده و مخلوط می شود. 10 سانتی متر از محلول آماده شده به یک کاتبا مخروط با ظرفیت 250 سانتی متر منتقل می شود." سانتی متر "آب 10 سانتی متر" از اسید سولفوریک رقیق شده (1: 4) و محتویات با محلول 0.1 نیتروژن اسید منگنز Katya تا صورتی تیتریک می شوند تا در صورتی که در مدت حداقل یک دقیقه از بین نروند. معرفها و آب (بدون پراکسید ، آب) بله).
کسر جرم پراکسید هیدروژن X.٪. محاسبه شده توسط فرمول
(v-v،) 0.0017 25 100 X ~ t
مقدار v دقیقا 0.1 n است. محلول پرمنگنات پتاسیم برای تیتراسیون محلول پراکسید هیدروژن ، سانتی متر صرف می شود. گرم ، مقدار دقیقاً 0.1 n است. محلول پرمنگنات پتاسیم برای تیتراسیون کنترل ، سانتی متر استفاده می شود.
0.0017 - پراکسید هیدروژن نقدی مطابق با 1 سانتی متر دقیقا 0.1 N. محلول پرمنگنات پتاسیم ، g؛ t - وزن آن از پراکسید هیدروژن ، گرم.
2.3.4. تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪
برای تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ ، محلول غلیظ موجود ، بسته به محتوای پراکسید هیدروژن موجود در آن ، با آب رقیق می شود که قبلاً جوش داده شده و سرد می شود. محلول به سرعت تجزیه می شود ، بنابراین باید در مقدار غیر قابل توجهی تهیه شود.
محلول ها باید در یک بطری شیشه ای تیره و در یک مکان خنک نگهداری شوند.
2.4 آناش
محصول مورد آزمایش و آب مقطر اندازه گیری شده یا درون یک لوله آزمایش اندازه گیری می شود.
مقدار آب مقطر و محصول مورد تجزیه و تحلیل باید مطابق با آنچه در جدول ذکر شده است مطابقت داشته باشد. 1
|
جدول اول |
نوشیدنی های شیر ترش همراه با نوشیدنی های میوه ای و توت از طریق فیلتر کاغذی فیلتر می شوند. پاستوریزاسیون مشخص می شود اما واکنش فیلتات با نشاسته یدید پتاسیم مشخص می شود.
برای به دست آوردن 2-3 سانتی متر پلاسما ، 50 گرم کره در دمای بیش از 50 درجه سانتیگراد ذوب می شود سپس خنک می شود و لایه یخ زده چربی برداشته می شود.
Peclet با افزودن آب ، محصولات آنالیز شده با میله شیشه ای کاملاً مالیده می شوند. سپس 2.5 سانتی متر از مخلوط بافر درون یک لوله آزمایش با مقدار مشخص شده محصول و آب ریخته می شود ، با میله شیشه ای کاملاً مخلوط می شود و در یک حمام آب با دمای آب (2 35 35) * C. قرار می گیرد که در آن 3-5 دقیقه نگه داشته می شود تا محتویات لوله آزمایش این درجه حرارت را بپذیرد. سپس 6 قطره از محلول 0.5٪ پراکسید هیدروژن و 3 قطره از محلول اسید هیدروکلریک paraphenylenediamine را اضافه کنید ، محتویات لوله را با حرکات چرخشی بعد از اضافه کردن هر معرف اضافه کنید. بعد از این ، دوباره ؛ دوباره؛) لوله را در یک حمام آب ریخته و تغییر را مشاهده کنید. رنگ مایع است.
(نسخه اصلاح شده. اصلاح .V 4).
2.5. ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم پراکسیداز در شیر و لبنیات ، محتوای محتوای لوله تغییر نمی کند. بنابراین ، شیر و فرآورده های مادر در دمای پایین تر از S0 * C پاستوریزه شدند.
با حضور پراکسیداز در شیر ، خامه ، کره ، محتویات لوله ها به رنگ آبی تیره می شود. در حضور پراكسیداز در فرآورده های شیر تخمیر شده و شیرینی خامه ای ، محتویات لوله ها یك رنگ خاکستری بنفش به دست می آورند و به تدریج به رنگ آبی تیره تبدیل می شوند. بنابراین ، شیر و فرآورده های لبنی در دمای زیر 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه شدند. یا با غذاهای غیرقانونی مخلوط شده بودند. حساسیت این روش امکان افزودن حداقل 5٪ از محصولات مادر غیرپاستوریزه به محصولات پاستوریزه را می دهد.
(نسخه اصلاح شده. اصلاح .V 2).
H. تعیین پراکسیداز توسط واکنش با یک مودست. Shevych starch.yum
2.6. جوهر روش
این روش مبتنی بر مصرف پراکسید هیدروژن توسط آنزیم پراکسیداز است. موجود در شیر و لبنیات. اکسیژن فعال آزاد شده در حین هیدراتاسیون پراکسید یدید پتاسیم را اکسید می کند و ید را آزاد می کند. ترکیب مرکب از رنگ آبی با نشاسته.
2.7 تجهیزات ، مواد و رجنتس: تجهیزات مطابق با n. 2.2؛
پراکسید هیدروژن "پزشکی * اما محلول GOST 10929.0.5٪؛
یدید پتاسیم مطابق با GOST4232. x ح. بروید ح. الف؛
قیف شیشه ای V-56-80 HU-1 مطابق با GOST 25336؛
فیلترهای کاغذ با قطر 11 سانتی متر.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاح .N؟ 4).
2.8 آماده شدن برای آناش
2.8.1. تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ مطابق بند 2.3.4.
2.8.2. پخت و پز iodistocash krahias
3 گرم نشاسته با خطای بیش از 0.01 گرم وزن داده شده و تا 5-10 سانتی متر از آب سرد مقطر مخلوط می شود تا جرم همگن حاصل شود. به طور جداگانه ، 100 سانتی متر آب مقطر به جوش آورده شده در یک فلاسک آورده شد و با همزن مداوم ، آب به نشاسته رقیق شده اضافه شد تا از تشکیل توده ها جلوگیری شود. محلول حاصل به جوش آورده شد. پس از خنک شدن ، 3 گرم یدید پتاسیم به محلول نشاسته اضافه می شود و تا زمان انحلال کریستال های یدید کاتدیک هم زده می شود.
محلول نشاسته ید نشاسته یک معرف ناپایدار است ، بنابراین باید به مقدار کمی تهیه شود و حداکثر دو روز در یک مکان تاریک و خنک نگهداری شود.
2.8.3. بررسی مناسب بودن محلول فروپاشی ید-کش با w
برای تعیین مناسب بودن محلول نشاسته ید پتاسیم ، که بیش از دو روز ذخیره می شود ، باید قبل از استفاده بررسی شود. برای انجام این کار ، در یک لوله آزمایش باید Beacon 5 سانتی متر را بجوشانید. خنک ، 5 قطره از محلول ید نشاسته و 5 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ و اضافه کنید و مخلوط کنید. ظاهر یک رنگ آبی تیره یا خاکستری مایل به آبی نشانگر نامناسب بودن ماش است.
2.8.4. به جای یدید نشاسته پتاسیم ، مجاز به استفاده از محلول نشاسته 1٪ نشاسته و 10٪ محلول یدید پتاسیم است.
2.9 نگه داشتن آناش
اندازه گیری یا توزین محصولات و آبهای مورد بررسی و تهیه پلاسمای روغن طبق بند 2.4 انجام می شود.
5 قطره از محلول نشاسته یدید پتاسیم و 5 قطره محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ در لوله آزمایش با مقدار مشخص شده محصول و آب ریخته می شود و محتویات لوله آزمایش پس از اضافه کردن هر معرف با حرکات چرخشی مخلوط می شوند. سپس وجود پراکسیداز اما تغییر رنگ را تعیین کنید.
اگر محلول نشاسته و یدید پتاسیم به طور جداگانه استفاده می شود ، به شرح زیر عمل کنید: در هر لوله آزمایش با محصولات. آماده و آماده شده است. همانطور که در بند 2.4 نشان داده شده است ، 0.5 سانتی متر از محلول 1٪ نشاسته اضافه می شود. 2 قطره از محلول 10٪ یدید پتاسیم و 5 قطره از محلول 0.5٪ پراکسید هیدروژن ، محتویات لوله های شبکیه را که به هر معرف اضافه می شود مخلوط کنید. سپس با تغییر رنگ میزان حضور پراکسیداز را تعیین کنید.
2.10 برش نمره.
در صورت عدم وجود آنزیم پراکسیداز در شیر و لبنیات ، رنگ محتویات لوله ns تغییر می کند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 80 * C پاستوریزه شدند.
اگر وجود پراکسیداز در شیر ، خامه ، کره ، محتویات لوله ها به رنگ آبی تیره شود. با حضور پراکسیداز در فرآورده های شیر تخمیر شده و روغن خامه ترش ، محتویات لوله ها در بیش از 2 دقیقه یک رنگ خاکستری مایل به آبی به دست می آورند ، که به تدریج به رنگ آبی تیره تبدیل می شوند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای زیر 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشدند. یا با محصولات مادر غیرمستقیم مخلوط شده بودند. ظاهر رنگ در لوله های آزمایش کمتر از 2 دقیقه پس از افزودن نشاسته پتاسیم یدید و پراکسید هیدروژن نشان دهنده عدم پاستوریزاسیون نیست. زیرا می تواند ناشی از تجزیه مواد معرف باشد.
حساسیت این روش باعث می شود علاوه بر این حداقل 5٪ از محصولات چراغ غیرمستقیم را به محصولات پاستوریزه و همچنین برای نوشیدنی هایی با میوه و انواع توت ها -0.5 ect تشخیص دهید. (اصطلاحات اصلاح شده ، مضمون شماره 2. 4).
3- روشهاي تعيين فسفاتاز
3.1a فسفاتاز در دمای پاستوریزه حداقل 63 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری 30 دقیقه غیرفعال می شود.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاح .V؟ 2).
الف. تعیین واکنش فسفات با 4-آمینو-1-پیریدین (روش داوری)
3.1 جوهر روش
این روش مبتنی بر هیدرولیز نمک دی سدیم است<|>enyl (| k\u003e s)<|>اسید هیدروکلریک توسط آنزیم فسفاتاز موجود در شیر و محصولات مادر. فنل آزاد آزاد شده در حین هیدرا و روی در حضور یک ماده اکسید کننده ، رنگ صورتی را با 4 آمینوآتیپیرین ایجاد می کند.
3.2 تجهیزات ، مواد و معرفها: تعادل آزمایشگاهی تحلیلی. مقیاس آزمایشگاه فنی
شیشه قیف در 56-80 HU-1 GOST 25336. فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر "مطابق با GOST 1770؛
فیلترهای کاغذ با قطر 11 سانتی متر؛ کاغذ نشانگر جهانی pH 1-10؛ هیدروکسید سدیم اما GOST 4328. x ح. یا ح. الف. 1 ن. راه حل؛ کربن فعال
(ویرایش اصلاح شده. احیاء شماره 2 ، 3 ، 4).
3.3 آماده سازی تجزیه و تحلیل
شیر پاستوریزه ، خامه ، نوشیدنی های شیر ترش ، ماست نیازی به آماده سازی اضافی برای تجزیه و تحلیل ندارد. پنیر کلم و خامه ترش را باید با آب مقطر رقیق کرد. برای این کار ، 1 گرم پنیر و خامه ترش را درون یک لوله آزمایش بریزید و با 2 سانتی متر آب مقطر کاملاً مخلوط کنید.
نوشیدنی های شیر ترش با پرکننده های میوه و توت باید از طریق فیلتر کاغذی با ذغال فعال (2 گرم کربن فعال در 25 سانتی متر "محصول) فیلتر شود. سرم و فیلترهای نوشیدنی های شیر ترش با پرکننده های میوه و توت باید با محلول هیدروکسید سدیم تا pH 6. کنترل شوند. بر روی یک مقاله نشانگر جهانی. (نسخه اصلاح شده. اصلاحیه شماره 4).
3.3.1. تهیه مایع حفاری اصلی (0.2 pH 10 pH)
40 گرم کلرید آمونیوم (NH4 CI). با خطای بیش از 0.01 گرم معلق ، در 100-200 سانتی متر "آب مقطر حل شده ، 348 سانتی متر" 25٪ آمونیاک آبی (NH 4 OH) اضافه کرده و با آب مقطر به Dmm تنظیم کنید.
3.3.2. آماده بستر ienue تهیه محلول A
1.25 سدیم دی سدیم فنیل فسفوریک اسید (CHH 0 4 PNa ،). وزن آن با دقت بیش از 0.0002 گرم در 100 سانتی متر "محلول بافر اصلی حل شده است.
/ 1 آماده. راه حل ده ب
0.8 گرم 4-آمینوآتیپیرین (С ^ НццСЖ.Рч "Н ،) یک خطای وزنی بیشتر از 0.0002 گرم در 900 سانتی متر" آب مقطر حل می شود.
محلولهای A و B باید بی رنگ بوده و در گلدان های شیشه ای تیره در هالودیلک نگهداری شوند. مدت زمان ماندگاری 1 ماه نیست. راه حل های زرد برای کار مناسب نیست.
محلول کار بستر بلافاصله قبل از تعیین واکنش با مخلوط کردن محلولهای A و B تهیه می شود (1 ؛ 9). گل کار هنگام نگهداری در یک بطری شیشه ای تاری 8 ساعت مناسب است.
در صورت لزوم ، نمک اسید فنیل فسفوریک دی سدیم با شستن با اتیل اتر تا حذف کامل از فنل آزاد خالص می شود (|\u003e کتان. rsak خشک psh در دمای اتاق تحت پیش نویس.
3.3.3. آماده سازی. سیستم های مس و مس را بارگیری کنید.
30 گرم سولفات روی (ZnS04 B 7N.O) و 6 گرم سولفات مس (CuSO ، 5N.O). با خطای بیش از 0.01 گرم معلق در 1 لیتر آب مقطر حل شده است.
3.3.4. آماده سازی I n. محلول هیدروکسید سدیم
40 گرم هیدروکسید سدیم کریستالی را با محلول بیش از 0.1 گرم وزن ندهید و در آب مقطر در یک فلاسک حجمی 1 dm 'حل کنید و حجم آن را به علامت بزنید.
3.3.5. ذغال را در قرص ها فعال کنید تا در یک کاسه خرد شود.
3.3.4. 3.3.5. (علاوه بر این معرفی شده است. اصلاح شماره 4).
3.4 تحلیل
به 3 سانتیمتر شیر ، خامه ، کفیر ، ماست و سرم که قبلاً برای تجزیه و تحلیل طبق بخش 3.3 تهیه شده بودند ، به مقدار 2 سانتی متر محلول کار بستر اضافه کرده و سپس محتویات لوله را مخلوط کرده و در یک حمام آب گرم شده با دمای 40-40 درجه سانتیگراد به مدت 30 گرم قرار می دهیم. حداقل 5 سانتی متر را به لوله آزمایش برداشته شده از حمام آب اضافه کنید "رسوب! من از سیستم های مس و مس استفاده می کنم ، کاملاً مخلوط کنید: لوله ها به مدت 10 دقیقه در دمای 40-45 درجه سانتیگراد در حمام آب قرار می گیرند. بیرون کشیدن
یک لوله آزمایش از حمام ، یک آزمایش بصری از محتویات لوله آزمایش محصول آزمایش با آزمایش کنترل مقایسه کنید.
آزمایش کنترل برای همه محصولات یک واکنش مشابه با شیر آب پز است. اگر آزمایش کنترل با شیر آب پز یک رنگ کمی صورتی به شما بدهد - فنیل فسفات دی سدیم باید بیشتر توسط آن خالص شود و. 3.3.2.
(نسخه اصلاح شده. اصلاحات شماره 2. 4).
3.5. ارزیابی نتایج
3.5.1. در صورت عدم وجود آنزیم<]юсфаглзы в молоке и молочных продуктах окраска содержимого пробирки (раствора, отделившегося от осажденного белка) бесцветная, т. е. аналогичная содержимому пробирок конфального опыта. Следовательно, молоко и молочные продукты подвергались пастеризации при температуре не ниже 631C.
در صورت وجود فسفاتاز در شیر و فراورده های لبنی ، محتوای لوله ها (محلول) به رنگ صورتی تا قرمز تیره است. در نتیجه ، شیر و فراورده های لبنی در دمای زیر 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده و یا با محصولات لبنی غیرمستقیم مخلوط شدند.
هنگام ارزیابی واکنش ، فقط رنگ مورد توجه قرار می گیرد ، اما نه شفافیت راه حل.
حساسیت این روش باعث می شود علاوه بر این ، محصولات اضافی غیر پاستوریزه شده را به محصولات پاستوریزه تشخیص دهید: 0.3٪ در شیر ، خامه ، نوشیدنی های شیر ترش و 0.5٪ در پنیر کلوچه و خامه ترش و 1٪ در نوشیدنی هایی با میوه و انواع توت و آب پنیر.
3.5.2. پنیر کلوچه و خامه ترش برای پاستوریزه کردن مواد اولیه - شیر و خامه توسط فسفاتاز تعیین می شود حداکثر هفت روز از زمان کویر ، خامه ترش - حداکثر بعد از پنج روز.
تعیین پاستوریزه کردن انواع لبنیات ، نوشیدنی های خامه ای و فرآورده های پنیر لپه با پرکننده ها و محصولات حاصل از آب پنیر باید با کنترل مواد اولیه (شیر ، خامه ، پنیر لپه ، آب پنیر) مطابق با تفاوت انجام شود. 3 A.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحات شماره 2 ، 4).
ب - تعیین فسفاتاز با واکنش با سدیم فنل فتالاتین فسفات
3.6. جوهر روش
این روش براساس هیدرولیز فسفات سدیم فنال فتالاتین با آنزیم فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات است. فنول فتالین آزاد شده در هنگام تجزیه در محیط قلیایی ، رنگ صورتی می فرستد.
3.7 تجهیزات ، مواد و رجنتس:
تجهیزات مطابق با n 2.2؛
شاخه های لاستیکی.
3.8 آماده سازی شیعه
3.8.1. تهیه (مخلوط بافر تغذیه شده)
80 سانتی متر "1 n. محلول آمونیاک با 20 cm "I N. محلول کلرید آمونیوم (pH 9.8) مخلوط می شود.
3.8.2. تهیه محلول 0.1٪ (|\u003e سدیم فسفات سدیم فسفات.
0.1 گرم پودر فنل فتالاتین فسفات سدیم ، با خطای بیش از 0،0002 گرم وزن داده می شود ، در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 100 سانتی متر با مقدار کمی مخلوط بافر حل می شود ، سپس مخلوط بافر را به آن اضافه کرده و مخلوط کنید.
3.9 تحلیل
محصول تجزیه و تحلیل ، آب مقطر و معرف در لوله آزمایش اندازه گیری می شود. مقدار محصول مورد تجزیه و تحلیل ، آب مقطر و معرف باید مطابق با مقدار ذکر شده در جدول باشد. 2
|
جدول 2 |
||||||||||||||||||||
|
پس از افزودن آب مقطر و معرف ، محتویات لوله با یک درپوش بسته می شوند و می لرزند.
سپس لوله در حمام آب با دمای آب 40 تا 45 * C قرار می گیرد و رنگ محتویات لوله پس از 10 دقیقه و بعد از 1 ساعت مشخص می شود.
3.10 ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم فسفاتاز در شیر و محصولات مادر ، رنگ محتویات لوله تغییر نمی کند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند. با وجود فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات ، محتویات لوله از صورتی روشن به صورتی روشن تبدیل می شود. بنابراین ، شیر و لبنیات در دمای کمتر از 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده بودند ، یا با محصولات غیرمستقیم مخلوط شدند.
حساسیت روش به شما امکان می دهد علاوه بر این حداقل 2٪ از محصولات مادر غیر پاستوریزه را به پاستوریزه شدن نیز تشخیص دهید.
تعیین پاستوریزه کردن انواع لبنیات ، نوشیدنی های خامه ای باید با کنترل مواد اولیه (شیر ، خامه) مطابق با Sec انجام شود. 3 ب.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2).
4- روش تعیین اسید اسید چربی
4.1 فسفاتاز اسید در دمای پاستوریزه کردن شیر و خامه 85 * C با مدت زمان نگهداری حداقل 30 دقیقه ، 90 * C با مدت زمان نگهداری حداقل 5 دقیقه و جوش غیرفعال می شود. عملیات حرارتی کرم 103 * C با قرار گرفتن در معرض 15-20 ثانیه.
روش تعیین اسید فسفاتاز برای کنترل اثربخشی عملیات حرارتی طراحی شده است.
4.2. جوهر روش
این روش بر اساس خاصیت اسید فسفاتاز برای كاتالیزاسیون در pH (0.05 00 4.00) محلول پیرولیز d و نمك سدیم اسید فنیل فسفوریك اسید برای ایجاد فنل و سدیم فسفات است. فنل با 4 آمینوآنسیپیرین ، هنگامی که یک رسوب سیستم مس و روی اضافه می شود ، در شرایط یک واکنش قلیایی ، یک ترکیب رنگی را تشکیل می دهد ، که شدت رنگ را از صورتی ضعیف به گیلاس تیره (بسته به غلظت فنل) تغییر می دهد. تفاوت در شدت رنگ نمونه های آزمایش و کنترل میزان فعالیت اسید فسفاتاز (چه رژیم های عملیات حرارتی مشاهده شود) را تعیین می کند.
اسید هیدروکلریک. 0.1 mol / dm. ثابت
اسید استیک یخبندان اما GOST 61 .x. ساعت
مس اسید سولفوریک 5 آب مطابق با GOST 4165. ساعت
متیل پرتقال ، نشانگر با کسر جرم 0.1٪.
نمک سدیم دی اکسید فنیل فسفریک از 2-آب. ساعت
روی 7 سولفات روی اما GOST 4174. ساعت
4.4 آماده سازی تجزیه و تحلیل
4.4.1. تهیه محلول بافر
72 سانتی متر اسید استیک یخبندان به یک فلاسک حجمی 10 لیتری (H) cm * اضافه شد ، که با آب مقطر به مارک تنظیم می شود و مخلوط می شود. سپس با محلول غلیظ هیدروکسید سدیم به pH (0.05 3. 78/3) قلیایی می شود.
4.4.2. تهیه و ذخیره سازی محلول اسید فنل فسفریک اسید دی سدیم و 4-a مینو پیانین.
(0.3 (H) ± 0.001) گرم نمک دی سدیم فنیل فسفریک و (0.001 0.0 0.021) گرم 4-aminoantipyrine به یک فلاسک حجمی با ظرفیت PC) cm cm cm اضافه می شود. محلول بلافاصله قبل از تجزیه و تحلیل تهیه می شود.
این معرف در دمای تاریک و در دمای 5 20 20 درجه سانتیگراد بیش از 2 ساعت ذخیره نمی شود.
4.4.3. تهیه رسوب گالوانیزه مس
درون یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر ، 0.05 sulf 0.05) سولفات روی و (ZO. (H) ± 0.05) گرم مس اسید سولفوریک اضافه می شود ، در آب مقطر حل می شود ، حجم آن با آب مقطر به مارک ساخته می شود.
4.4.4. تهیه محلول آمونیاک 3 mol / dm "و تعیین غلظت آن
در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر ، 333 سانتی متر از آمونیاک را با کسری از 25٪ تا علامت با آب مقطر رقیق کنید.
غلظت محلول آمونیاک با محلول اسید هیدروکلریک 0.2 mol / dm با استفاده از محلول با کسر جرم 0.1٪ متیل پرتقال به عنوان شاخص بررسی می شود. 1 سانتیمتر از محلول آمونیاک آزمایش شده در فلاسک مخروطی وارد می شود. 50 سانتی متر "از آب مقطر. 1-2 قطره از آب ، با مخلوط 0.2 mol / dm 'هیدروکلریک اسید مخلوط و تیتراژ شود. غلظت آمونیاک با استفاده از فرمول تنظیم می شود
که در آن K غلظت مولر محلول تست آمونیاک ، mol / DM است.
0.2 - غلظت مولی اسید هیدروکلریک ، mol / dm '؛
A حجم اسید هیدروکلریک صرف شده برای تیتراسیون ، سانتی متر است.
محلول آمونیاک در یک ظرف محکم محکم ذخیره می شود. قبل از مصرف آمونیاک ، محتوای بطری مخلوط می شود.
4.5 انجام
4.5.1. تهیه نمونه آزمایشی
شیر یا خامه تست شده در سه لوله 1 سانتی متر اضافه می شود. به یکی از لوله های آزمایش شده با شیر یا خامه K) سانتی متر از محلول اسید فنل فسفریک اسید دی سدیم و 4-آمینهانت- اضافه کنید
پیرین مخلوط کنید ، در حمام آب یا فوق ترموستات با درجه حرارت (1 36 36 36) * هم بزنید. در فواصل منظم ، به عنوان مثال 1 دقیقه. عملیات فوق بصورت متوالی با دو لوله دیگر انجام می شود. مدت زمان قرار گرفتن در معرض هر سه لوله در یک حمام آب یا ماوراء ترموستات که توسط یک کرنومتر کنترل می شود ، 90 دقیقه است. سپس ، آنها از بورت با ظرفیت 25 سانتی متر "یا پیپت 1 سانتی متر" با استفاده از یک رسوب روی مس اندازه گیری می شوند. 0.6 سانتی متر از محلول با غلظت آمونیاک 3 mol / dm "در فواصل زمانی مشابه وقتی که با محلول نمکی از اسید فنیل فسفوریک و 4-آمینانتیپیرین مخلوط می شود ، بعد از افزودن هر معرف ، آنرا هم بزنید ، فیلتر کنید و برای 60 دقیقه در دمای 5 20 20 دقیقه انکوبه کنید. * اس.
4.5.2. تهیه نمونه شاهد
یک نمونه شاهد به روش زیر تهیه شده است: 10 سانتی متر * از محلول نمک دی سدیم اسید فنیل فسفوریک و 4-آمینوآنتیپیرین به سه لوله اضافه می شود. مانند نمونه های آزمایشی در دمای (I ± 36) * C 90 دقیقه بایستید. لوله های آزمایش از حمام آب یا ilyratsrmos-tat برداشته می شوند. 1 سانتیمتر از رسوب دهنده "روی ، مس ، I سانتی متر" شیر تست یا خامه و 0.6 سانتی متر محلول با غلظت آمونیاک 3 mol / dm * اضافه کنید (هم زدن بعد از هر افزودنی انجام می شود) ، فیلتر شده و به مدت 60 دقیقه در دمای 5 20 20 20 نگه دارید. ) * ج.
به منظور جلوگیری از ورود فنل های خارجی به محتویات لوله ها ، لوله های نوع P2 با فویل پوشانده شده اند. مخلوط کردن با چرخاندن لوله ها 2 بار 180 بار و بازگشت اوه به روکش اصلی انجام می شود.
4.6. ارزیابی نتایج
با غیرفعال کردن عرق کردن اسید فسفاتاز در شیر خامه ، رنگ نمونه های آزمایشی با رنگ نمونه های شاهد تفاوت دارد. در نتیجه ، شیر و خامه در دمای 85 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 30 دقیقه پاستوریزه شد و 90 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 5 دقیقه و جوش خوردن ؛ این کرم در دمای 103 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداري 15-20 ثانیه در معرض عملیات حرارتی قرار گرفت.
بسته به فعالیت اسید فسفاتاز در شیر و خامه ، رنگ نمونه های آزمایشی رنگ را از کمی صورتی (اما روشن تر از رنگ نمونه های شاهد) به گیلاس تیره تغییر می دهد. بنابراین ، وجود فعالیت پسیفسفات نشان دهنده عدم رعایت رژیمهای عملیات حرارتی است.
2.2, 3.2, 3.7, 4.3
5- مدت اعتبار طبق پروتکل N 3-93 شورای بین المللی استاندارد ، اندازه گیری و صدور گواهینامه برداشته شده است (IMS 5-6-93)
6. ویرایش اصلاح شده در شماره 2 ، 3 ، 4 ، 5 ، مصوب اکتبر 1978 ، اوت 1980 ، ژوئن 1982 ، سپتامبر 1989 (IMS 11-77 ، 10-80 ، 9-82 ، 1-90)
اصلاحیه منتشر شده در IMS N 6 ، 2011
اصلاحاتی که توسط سازنده بانک اطلاعات انجام شده است
این استاندارد در ارزیابی اثربخشی پاستوریزه کردن مواد اولیه ای که از آنها تهیه می شود ، در مورد شیر پاستوریزه ، خامه ، کره ، کره ، آب پنیر و تعیین روش هایی برای تعیین پاستوریزاسیون استفاده می کند ، همچنین پنیر ، خامه ترش ، کره ، نوشیدنی های شیر تخمیر شده و سایر محصولات لبنی.
1. نمونه گیری
1.1. نمونه برداری از شیر و لبنیات توسط انجام می شود GOST 26809 و GOST 13928.
2.1a پراکسیداز در دمای پاستوریزه حداقل 80 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری 30-20 ثانیه غیرفعال می شود.
(علاوه بر این ، اصلاحات شماره 2).
الف - روش تعیین پراکسیداز با واکنش با هیدروکلراید رافنیلن دی آمین
2.1. جوهر روش
این روش بر پایه تجزیه پراکسید هیدروژن توسط آنزیم پراکسیداز موجود در شیر و لبنیات است.
اکسیژن فعال آزاد شده با تجزیه پراکسید هیدروژن توسط paraphenylenediamine اکسیده می شود و یک ترکیب آبی تشکیل می دهد.
2.2. تجهیزات ، مواد و معرفها:
لوله های آزمایش بر روی GOST 23932 ;
پیپت هایی با ظرفیت 2 و 5 سانتی متر GOST 29169 ;
پیپت هایی با ظرفیت 5 یا 10 سانتی متر با قیمت فارغ التحصیلی 0.1 سانتی متر در GOST 29169 ;
شیشه های تیره یا پوشش داده شده با لاک سیاه؛
فلاسک های حجمی با ظرفیت 250 و 500 سانتی متر GOST 1770 ;
فلاسک های مخروطی با ظرفیت 250 سانتی متر GOST 1770 ;
حمام آب با یک دستگاه گرمایشی؛
هیدروکلراید paraphenylenediamine ، محلول آبی 2٪. محلول ناپایدار است ، باید در یک بطری شیشه ای تیره با یک درپوش محکم بسته ، در یک مکان تاریک و خنک نگهداری شود.
اسید سیتریک کریستالی GOST 3652 ، ح.چ. یا b.p .؛
اسید سولفوریک GOST 4204 ، از نظر شیمیایی خالص ، غلیظ ،
پرمنگنات پتاسیم GOST 20490 ، 0.1 نانومتر راه حل؛
GOST 177 پزشکی یا GOST 10929 ، از نظر شیمیایی خالص ، محلول 0.5٪؛
آب مقطر GOST 6709 ;
فسفات سدیم کریستالی دی سدیم GOST 11773 ؛ ح.چ. یا ch.a.
2.3 آماده سازی تجزیه و تحلیل
2.3.1. آزمایش مناسب بودن محلول 2٪ هیدروکلراید parhenhenenenamine
در هنگام استفاده از محلول 2٪ هیدروکلراید پارافیلیلن دی آمین ، که بیش از 1-2 روز ذخیره می شود ، باید از مناسب بودن آن بررسی شود. برای این کار ، در یک لوله آزمایش باید 5 سانتی متر شیر جوشانده ، خنک شود ، 2.5 سانتی متر از مخلوط بافر را اضافه کنید ، مخلوط کنید و به مدت 3-5 دقیقه در یک حمام آب با دمای آب (2 35 35) درجه سانتیگراد قرار دهید. سپس 6 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 5/0٪ و 3 قطره از محلول هیدروکلراید پارافیلیلن دی آمین را اضافه کنید ، دوباره مخلوط کرده و دوباره در یک حمام آب قرار دهید. ظاهر یک رنگ آبی تیره یا خاکستری مایل به آبی نشانگر نامناسب بودن محلول است.
2.3.2. آماده سازی بافر
97 گرم فسفات سدیم حل نشده و 65/0 گرم اسید سیتریک ، وزن شده با خطای بیشتر از 0/0002 گرم در آب مقطر در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 500 سانتی متر حل نمی شود ، به مارک اضافه می شود و هم زده می شود. مخلوط بافر باید در یک بطری شیشه ای تیره و با یک محکم بسته نگه داشته شود.
2.3.3. تعیین پراکسید هیدروژن در یک محلول غلیظ
3-4 گرم پراکسید هیدروژن غلیظ ، با وزن حداکثر 0.01 گرم وزن ، بدون از بین رفتن به یک فلاسک حجمی با ظرفیت 250 سانتی متر منتقل می شود ، با آب با مارک تنظیم می شود و مخلوط می شود. 10 سانتی متر از محلول آماده شده به یک فلاسک مخروطی با ظرفیت 250 سانتی متر منتقل می شود ، 50 سانتی متر آب ، 10 سانتی متر اسید سولفوریک رقیق شده (1: 4) اضافه می کنیم و محتویات آن با 0.1 N تیتراژ می شود. محلول پرمنگنات پتاسیم تا صورتی ، در عرض 1 دقیقه از بین نمی رود. به موازات آن ، یک آزمایش کنترل با همان شرایط و با همان مقدار معرف و آب (بدون پراکسید هیدروژن) انجام می شود.
کسر جرم پراکسید هیدروژن ،٪ ، توسط فرمول محاسبه می شود
مقدار دقیقاً 0.1 نیکل در کجا قرار دارد. محلول پرمنگنات پتاسیم برای تیتراسیون یک محلول پراکسید هیدروژن ، سانتی متر صرف می شود.
مقدار آن دقیقا 0.1. n نانو است. محلول پرمنگنات پتاسیم برای تیتراسیون کنترل ، سانتی متر استفاده می شود.
0.0017 - مقدار پراکسید هیدروژن مربوط به 1 سانتی متر دقیقا 0.1 N. محلول پرمنگنات پتاسیم ، g؛
- بخشی از پراکسید هیدروژن ، گرم.
2.3.4. تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪
برای تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ ، محلول غلیظ موجود ، بسته به محتوای پراکسید هیدروژن موجود در آن ، با آب رقیق می شود که قبلاً جوش داده شده و سرد می شود. محلول به سرعت تجزیه می شود ، بنابراین باید در مقادیر کمی تهیه شود.
محلول ها باید در یک بطری شیشه ای تیره و در یک مکان خنک نگهداری شوند.
2.4 تحلیل
محصول مورد آزمایش و آب مقطر اندازه گیری شده یا درون یک لوله آزمایش اندازه گیری می شود.
مقدار آب مقطر و محصول مورد تجزیه و تحلیل باید مطابق با مقدار ذکر شده در جدول 1 باشد.
جدول 1
نام محصول | مقدار محصول | |
شیر پاستوریزه | ||
نوشیدنی های شیر ترش (کفیر ، شیر اسیدوفیلوس ، اسیدوفیلوس ، کومانت ، ماست و غیره)؛ ماست ، نوشیدنی با میوه و انواع توت ها (فیلتر) | ||
محصولات پروتئینی (پنیر لپه ، محصولات ترش ، ماکارونی و غیره) | ||
کره (پلاسما روغن) |
نوشیدنی های شیر ترش با پرکننده های میوه از طریق فیلتر کاغذی فیلتر می شوند.
پاستوریزاسیون با واکنش فیلتراسیون با نشاسته یدید پتاسیم تعیین می شود.
برای به دست آوردن 2-3 سانتی متر پلاسما روغن ، 50 گرم کره در دمای بیش از 50 درجه سانتیگراد ذوب می شود ، سپس خنک می شود و لایه جامد چربی برداشته می شود.
پس از افزودن آب ، محصولات مورد تجزیه و تحلیل با میله شیشه ای کاملاً مالیده می شوند.
سپس 2.5 سانتی متر از مخلوط بافر را درون یک لوله آزمایش با مقدار مشخص شده محصول و آب ریخته و کاملاً با میله شیشه ای مخلوط کرده و در یک حمام آب با دمای آب (2 35 35 °) درجه سانتیگراد قرار می دهیم ، جایی که برای مدت زمان 3-5 دقیقه نگه داشته می شود تا محتویات لوله آزمایش این دما را بگیرد. . سپس 6 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 5/0٪ و 3 قطره از محلول هیدروکلراید پارافیلیلن دی آمین اضافه شده و محتوای لوله پس از اضافه کردن هر معرف با حرکت حرکات مخلوط می شود. پس از آن ، لوله مجددا در حمام آب قرار می گیرد و تغییر رنگ مایع مشاهده می شود.
2.5. ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم پراکسیداز در شیر و لبنیات ، محتوای محتوای لوله تغییر نمی کند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند.
با حضور پراکسیداز در شیر ، خامه ، کره ، محتویات لوله ها به رنگ آبی تیره می شود. در حضور پراکسیداز در فرآورده های شیر تخمیر شده و روغن خامه ترش ، محتویات لوله ها رنگ خاکستری بنفش را به دست می آورند و به تدریج به رنگ آبی تیره تبدیل می شوند. بنابراین ، شیر و لبنیات در دمای کمتر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده بودند ، یا با محصولات غیرمستقیم مخلوط شدند. حساسیت روش اجازه می دهد تا علاوه بر این حداقل 5٪ از محصولات لبنی غیر پاستوریزه به پاستوریزه شدن نیز شناسایی شود.
ب - تعیین پراکسیداز توسط واکنش با نشاسته پتاسیم
2.6. جوهر روش
این روش بر پایه تجزیه پراکسید هیدروژن توسط آنزیم پراکسیداز موجود در شیر و لبنیات است. اکسیژن فعال که در هنگام تجزیه پراکسید هیدروژن آزاد می شود ، یدید پتاسیم را اکسید می کند و ید را آزاد می کند ، که ترکیبات آبی با نشاسته را تشکیل می دهد.
2.7 تجهیزات ، مواد و معرفها:
ادعا مطابق ادعای 2.2.
پراکسید هیدروژن (پراکسید) توسط GOST 177 پزشکی یا GOST 10929 ، از نظر شیمیایی خالص ، محلول 0.5٪؛
نشاسته سیب زمینی GOST 7699 ;
یدید پتاسیم توسط GOST 4232 ، ح.چ. یا b.p .؛
آب مقطر GOST 6709 ;
قیف شیشه ای B-56-80 HU-I GOST 25336 ;
فیلترهای کاغذ با قطر 11 سانتی متر.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 4).
2.8 آماده سازی تجزیه و تحلیل
2.8.1. تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ مطابق بند 2.3.4.
2.8.2. تهیه نشاسته یدید پتاسیم
3 گرم نشاسته با خطای بیش از 0.01 گرم وزن داده شده و با 5-10 سانتی متر آب سرد مقطر مخلوط می شود تا جرم همگن حاصل شود. به طور جداگانه 100 سانتی متر آب مقطر در یک فلاسک به جوش آورده می شود و با همزن مداوم ، آب به نشاسته رقیق شده اضافه می شود و از تشکیل توده ها جلوگیری می کند. محلول حاصل به جوش آورده شد. پس از خنک شدن ، 3 گرم یدید پتاسیم به محلول نشاسته اضافه می شود ، هم بزنید تا بلورهای یدید پتاسیم حل شوند.
محلول نشاسته ید پتاسیم یک معرف ناپایدار است ، بنابراین باید آن را به مقدار کمی تهیه کرده و در بیش از دو روز در یک مکان تاریک و خنک نگهداری کنید.
2.8.3. آزمایش مناسب بودن محلول نشاسته یدید پتاسیم
برای تعیین مناسب بودن محلول نشاسته ید پتاسیم ، که بیش از دو روز ذخیره می شود ، باید قبل از استفاده بررسی شود. برای انجام این کار ، در یک لوله آزمایش شما باید 5 سانتی متر شیر را خنک کنید ، خنک شود ، 5 قطره از محلول نشاسته یدید پتاسیم و 5 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ را بریزید و مخلوط کنید. ظاهر یک رنگ آبی تیره یا خاکستری مایل به آبی نشانگر نامناسب بودن محلول است.
2.8.4. به جای نشاسته ید-پتاسیم ، مجاز به استفاده از محلول نشاسته 1٪ نشاسته و 10٪ محلول یدید پتاسیم است.
2.9 تحلیل
اندازه گیری یا توزین محصولات و آبهای مورد بررسی و تهیه پلاسمای روغن طبق بند 2.4 انجام می شود.
5 قطره از محلول نشاسته یدید پتاسیم و 5 قطره محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ در لوله آزمایش با مقدار مشخص شده محصول و آب ریخته می شود و محتوای لوله پس از اضافه کردن هر معرف با حرکات دوار مخلوط می شود. سپس با تغییر رنگ ، میزان پراکسیداز را تعیین کنید.
اگر از محلول یدید نشاسته و پتاسیم به طور جداگانه استفاده می شود ، به شرح زیر عمل کنید: 0.5 سانتی متر از محلول 1٪ نشاسته ، 2 قطره از محلول یدید پتاسیم 10٪ با محصولات تهیه شده همانطور که در بخش 2.4 توضیح داده شده است در هر لوله ریخته می شود. و 5 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ ، محتویات لوله ها را بعد از اضافه کردن هر معرف مخلوط کنید ، سپس با تغییر رنگ ، میزان پراکسیداز را تعیین کنید.
2.10 ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم پراکسیداز در شیر و لبنیات ، محتوای محتوای لوله تغییر نخواهد کرد. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند.
با حضور پراکسیداز در شیر ، خامه ، کره ، محتویات لوله ها به رنگ آبی تیره می شود. با حضور پراکسیداز در فرآورده های شیر تخمیر شده و روغن خامه ترش ، محتویات لوله ها در بیش از 2 دقیقه یک رنگ خاکستری مایل به آبی به دست می آورند ، که به تدریج به رنگ آبی تیره تبدیل می شوند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای کمتر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده بودند ، یا با محصولات لبنی غیرمستقیم مخلوط شدند. بروز رنگ در لوله های آزمایش بیش از 2 دقیقه پس از افزودن نشاسته یدید پتاسیم و پراکسید هیدروژن نشان دهنده عدم پاستوریزاسیون نیست ، زیرا می تواند با تجزیه مواد معرف ایجاد شود.
حساسیت این روش امکان افزودن حداقل 5٪ از محصولات لبنی غیرپاستوریزه را به پاستوریزه شدن ، و برای نوشیدنی هایی که با پرکننده های میوه و انواع توت ها وجود دارند - 5/0٪ امکان پذیر است.
3.1a فسفاتاز در دمای پاستوریزه حداقل 63 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری 30 دقیقه غیرفعال می شود.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2).
الف) تعیین فسفاتاز توسط واکنش با 4-آمینوآنتیپیرین (روش داوری)
3.1 جوهر روش
این روش بر پایه هیدرولیز نمک دی سدیم از فنیل فسفوریک اسید با آنزیم فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات است. فنل آزاد آزاد شده در حین هیدرولیز با حضور یک ماده اکسید کننده ، یک رنگ صورتی را با 4 آمینوآتیپیرین ایجاد می کند.
3.2 تجهیزات ، مواد و معرفها:
مقیاس آزمایشگاهی تحلیلی؛
مقیاس آزمایشگاه فنی
لوله های آزمایش شیشه ای GOST 23932 ، اندازه 16150 میلی متر؛
اندازه گیری پیپت ها با ظرفیت 5 سانتی متر GOST 29169 ;
ملات چینی با گندم GOST 9147 ;
فلاسک مخروطی با ظرفیت 100 سانتی متر GOST 1770 ;
استوانه شیشه ای با ظرفیت 25 سانتی متر GOST 1770 ;
حمام آب؛
کلرید آمونیوم GOST 3773 ، از نظر شیمیایی خالص؛
آب آمونیاک GOST 3760 ، 25٪ ، درجه تحلیلی.
فنیل فسفوریک اسید سدیم سدیم دو آب - طبق اسناد فنی فعلی ، به روش مقرر تصویب می شود.
4-aminoantipyrine ، ح.
سولفات روی GOST 4174 ، از نظر شیمیایی خالص؛
سولفات مس GOST 4165 ، از نظر شیمیایی خالص؛
اتیل اتر؛
آب مقطر GOST 6709 ;
قیف شیشه ای B 56-80 HU-1 GOST 25336 ، اندازه گیری فلاسک با ظرفیت 1000 سانتی متر GOST 1770 ;
فیلترهای کاغذ با قطر 11 سانتی متر؛
کاغذ نشانگر جهانی pH 1-10؛
هیدروکسید سدیم توسط GOST 4328
کربن فعال
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 3 ، 4).
3.3 آماده سازی تجزیه و تحلیل
شیر پاستوریزه ، خامه ، نوشیدنی های شیر ترش ، ماست برای تهیه آنالیز نیاز به آماده سازی اضافی ندارد. پنیر کلم و خامه ترش را باید با آب مقطر رقیق کرد. برای این کار ، 1 گرم پنیر و خامه ترش را در یک لوله آزمایش قرار داده و با 2 سانتی متر آب مقطر کاملاً مخلوط کنید.
نوشیدنی های شیر ترش با پرکننده های میوه و توت باید از طریق فیلتر کاغذی با کربن فعال (2 گرم کربن فعال در هر 25 سانتی متر محصول) فیلتر شوند. سرم و فیلترهای نوشیدنی های شیر تخمیر شده با مواد تحریک کننده میوه و توت باید خنثی شوند. محلول هیدروکسید سدیم به pH 6 ، که توسط کاغذ نشانگر جهانی کنترل می شود.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 4).
3.3.1. تهیه محلول بافر اصلی (0.2 pH 10 pH)
40 گرم کلرید آمونیوم (NHCl) ، با خطای بیش از 0.01 گرم ، در 100-200 سانتی متر آب مقطر حل می شود ، 348 سانتی متر از آمونیاک آبی 25٪ (NHOH) اضافه شده و با آب مقطر 1 dm تنظیم می شود.
3.3.2. آماده سازی بستر
تهیه راه حل A
1.25 گرم نمک دی سدیم از فنیل فسفوریک اسید (CHOPNa) ، با خطای بیشتر از 0.0002 گرم وزن نشده ، در 100 سانتی متر از محلول اصلی بافر حل شده است.
تهیه محلول B
0.8 گرم 4-آمینوآتیپیرین (CHONNH) ، با خطای بیش از 10002 گرم وزن نشده است ، در 900 سانتی متر آب مقطر حل می شود.
محلولهای A و B باید بی رنگ بوده و در بطری های شیشه ای تیره در یخچال نگهداری شوند. ماندگاری بیشتر از 1 ماه نیست. راه حل های زرد برای کار مناسب نیست.
محلول کار بستر بلافاصله قبل از تعیین واکنش با مخلوط کردن محلولهای A و B تهیه می شود (1: 9). محلول کار به مدت 8 ساعت هنگام نگهداری در بطری شیشه ای تیره مناسب است.
در صورت لزوم ، نمک سدیم سدیم فنیل فسفریک با شستن با اتیل اتر از فنل آزاد خالص می شود تا اینکه فنل به طور کامل برداشته شود. معرف را در دمای اتاق زیر هکتار خشک کنید
3.3.3. تهیه رسوب گالوانیزه مس
30 گرم سولفات روی (ZnSO · 7HO) و 6 گرم سولفات مس (CuSO · 5HO) ، با یک خطای بیش از 0.01 گرم وزن نیست ، در 1 لیتر آب مقطر حل می شود.
3.3.4. پخت و پز 1 ن. محلول هیدروکسید سدیم
40 گرم هیدروکسید سدیم کریستالی با خطای بیش از 0.1 گرم وزن نداشته و 1 dm را در آب مقطر در یک فلاسک حجمی حل کنید و حجم آن را به علامت بزنید.
3.3.5. ذغال فعال در قرص ها در ملات آسیاب می شود.
3.3.4 ، 3.3.5. (علاوه بر این ، اصلاحات شماره 4).
3.4 تحلیل
به 3 سانتی متر شیر ، خامه ، کفیر ، ماست ، آب پنیر یا محصولاتی که قبلاً مطابق بند 3.3 برای تجزیه و تحلیل آماده شده بودید ، 2 سانتی متر از محلول کار بستر را اضافه کنید. سپس محتویات لوله مخلوط شده و در یک حمام آب گرم شده به مدت 40 دقیقه تا 40-45 درجه سانتیگراد قرار می گیرد. 5 سانتیمتر رسوب روی روی لوله آزمایش شده که از حمام آب جدا شده است ، اضافه می شود ، محتویات لوله آزمایش کاملاً مخلوط می شوند و در دمای 40-45 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه دوباره در حمام آب قرار می گیرند. پس از خارج کردن لوله از حمام ، مقایسه تصویری از محتویات لوله محصول آزمایش با آزمایش کنترل انجام می شود.
آزمایش کنترل برای همه محصولات یک واکنش مشابه با شیر آب پز است. اگر آزمایش كنترل با شیر آب پز رنگ كمی صورتی داشته باشد - فنیل فسفات دی سدیم طبق ماده 3.3.2 تحت تصفیه اضافی قرار می گیرد.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 4).
3.5. ارزیابی نتایج
3.5.1. در صورت عدم وجود آنزیم فسفاتاز در شیر و لبنیات ، رنگ محتوای لوله (محلول جدا شده از پروتئین رسوب شده) بی رنگ است ، یعنی مشابه محتویات لوله های آزمایش. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند.
در صورت وجود فسفاتاز در شیر و فراورده های لبنی ، محتوای لوله ها (محلول) به رنگ صورتی تا قرمز تیره است. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دماهای زیر 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده و یا با محصولات لبنی غیرمستقیم مخلوط شدند.
هنگام ارزیابی واکنش ، فقط رنگ مورد توجه قرار می گیرد ، اما نه شفافیت راه حل.
حساسیت این روش باعث می شود علاوه بر این ، محصولات لبنی نشده و غیره را به آنهایی که پاستوریزه شده اند نیز ردیابی کنید: 0.3٪ در شیر ، خامه ، نوشیدنی های شیر ترش و 0.5٪ در پنیر و خامه ترش و 1٪ در نوشیدنی هایی با میوه و توت فرنگی و آب پنیر.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 4).
3.5.2. پنیر کلوچه و خامه ترش برای پاستوریزه کردن مواد اولیه - شیر و خامه توسط فسفاتاز تعیین می شود حداکثر هفت روز از زمان کویر ، خامه ترش - حداکثر بعد از پنج روز.
تعیین پاستوریزاسیون در انواع لبنیات ، نوشیدنی های خامه ای و فراورده های پنیر با پرکننده ها و محصولات حاصل از آب پنیر باید با کنترل مواد اولیه خوراکی (شیر ، خامه ، پنیر لپه ، آب پنیر) مطابق بند 3 الف انجام شود.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 4).
ب - تعیین فسفاتاز با واکنش با سدیم فنل فتالاتین فسفات
3.6. جوهر روش
این روش بر پایه هیدرولیز فنل فتالاتین سدیم فسفات توسط آنزیم فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات است. فنول فتالین آزاد شده در حین هیدرولیز در یک محیط قلیایی ، رنگ صورتی را نشان می دهد.
3.7 تجهیزات ، مواد و معرفها:
ادعا مطابق ادعای 2.2.
آب آمونیاک GOST 3760 ، درجه تحلیلی ، 1 n. راه حل؛
کلرید آمونیوم GOST 3773 ، ح.چ. یا chaa ، 1 n. راه حل؛
مخلوط بافر آمونیاک؛
پودر فسفات فنل فتالاتین سدیم ، محلول 10 یا 0.1.
آب مقطر GOST 6709 ;
لوله های آزمایش شیشه ای GOST 23932 شیشه های بی رنگ با برچسب های چاپ شده به حجم 2 سانتی متر؛
اندازه گیری پیپت ها با ظرفیت 1 و 2 سانتی متر GOST 29169 ;
شاخه های لاستیکی.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2).
3.8 آماده سازی تجزیه و تحلیل
3.8.1. تهیه مخلوط بافر آمونیاک
80 cm 1 n. محلول آمونیاک با 20 cm 1 N مخلوط می شود. محلول کلرید آمونیوم (pH 9.8).
3.8.2. تهیه محلول فنل فتالین فسفات سدیم 0.1٪.
1/0 گرم پودر فنل فتالاتین سدیم فسفات ، وزن شده با خطای بیش از 0،0002 گرم ، در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 100 سانتی متر با مقدار کمی مخلوط بافر حل می شود ، سپس مخلوط بافر را به آن اضافه کرده و مخلوط می کنیم.
3.9 تحلیل
محصول تجزیه و تحلیل ، آب مقطر و معرف در لوله آزمایش اندازه گیری می شود. مقدار محصول مورد تجزیه و تحلیل ، آب مقطر و معرف باید مطابق با آنچه در جدول 2 آمده است باشد.
جدول 2
نام محصول | مقدار محصول ، سانتی متر | مقدار آب مقطر ، سانتی متر است | مقدار محلول فسفات فنل فتالاتین سدیم ، سانتی متر |
شیر پاستوریزه | |||
کرم | |||
نوشیدنی های شیر ترش: | |||
کفیر ، شیر اسیدوفیلوس ، اسیدوفیلوس ، کومانت ، ماست و غیره | |||
ماست |
پس از افزودن آب مقطر و معرف ، محتویات لوله با یک درپوش بسته می شوند و می لرزند.
سپس لوله در یک حمام آب با دمای آب از 40 تا 45 درجه سانتیگراد قرار می گیرد و رنگ محتویات لوله را بعد از 10 دقیقه و بعد از 1 ساعت مشخص می کند.
3.10 ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم فسفاتاز در شیر و لبنیات ، محتوای محتوای لوله تغییر نمی کند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند. با وجود فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات ، محتویات لوله از صورتی روشن به صورتی روشن تبدیل می شود. بنابراین ، شیر و لبنیات در دمای زیر 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده بودند ، یا با محصولات غیرمستقیم مخلوط شدند.
حساسیت روش به شما امکان می دهد علاوه بر این حداقل 2٪ از محصولات لبنی غیرمستقیم را به پاستوریزه شدن نیز تشخیص دهید.
تعیین پاستوریزاسیون در انواع لبنیات ، نوشیدنی های خامه ای باید با کنترل مواد اولیه (شیر ، خامه) مطابق با بند 3 ب انجام شود.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2).
4.1 فسفاتاز اسید در دمای پاستوریزه کردن شیر و خامه 85 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 30 دقیقه ، 90 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 5 دقیقه و جوش غیرفعال می شود. عملیات حرارتی کرم 103 درجه سانتیگراد با قرار گرفتن در معرض 15-20 ثانیه.
روش تعیین اسید فسفاتاز برای کنترل اثربخشی عملیات حرارتی طراحی شده است.
4.2. جوهر روش
این روش براساس خاصیت اسید فسفاتاز برای كاتالیزاسیون در pH (0.05 00 4.00) هیدرولیز نمك دی سدیم اسید فنیل فسفوریك اسید به منظور ایجاد فنل و سدیم فسفات است. فنل با 4 آمینوآنسیپیرین ، هنگامی که یک رسوب کننده سیستم مس و روی اضافه می شود ، در شرایط واکنش قلیایی ، یک ترکیب رنگی را تشکیل می دهد که شدت رنگ را از صورتی ضعیف به گیلاس تیره (بسته به غلظت فنل) تغییر می دهد. تفاوت در شدت رنگ نمونه های آزمایش و کنترل میزان فعالیت اسید فسفاتاز (چه رژیم های عملیات حرارتی مشاهده شود) را تعیین می کند.
4.3 تجهیزات ، مواد و رجنتس
آنالایزر پتانسیومتر با دامنه اندازه گیری 5/4 واحد. طبق pH ، امکان اندازه گیری pH با دقت 0.05 of فراهم می شود GOST 19881 یا GOST 16454
حمام آب با گرمایش قابل تنظیم یا فوق ترموستات ، کنترل دما از 25 تا 50 درجه سانتیگراد ، با دقت 1 درجه سانتیگراد را فراهم می کند.
بورتس 3-1-25-0.1؛ 3-2-25-0.1؛ 3-1-50-0.1؛ 3-2-50-0.1 GOST 29251.
مقیاس های آزمایشگاهی برای مصارف عمومی ، کلاس 2 درجه دقت با حداکثر وزن 200 گرم GOST 24104 GOST 25336 ایستاده برای لوله های آزمایش. ، ثابت. GOST 4174 ساعت
4.4 آماده سازی تجزیه و تحلیل
4.4.1. آماده سازی بافر
در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر ، 72 سانتی متر اسید استیک یخبندان اضافه می شود ، با آب مقطر به مارک تنظیم می شود و مخلوط می شود. سپس با محلول هیدروکسید سدیم غلیظ به pH (0.05 78 78/3) قلیایی می شود.
4.4.2. تهیه و ذخیره محلول نمک سدیم سدیم فنیل فسفوریک اسید و 4-آمینوآنتیپیرین.
در یک فلاسک حجمی 100 میلی لیتری ، (0.001 0.3 0.300) گرم نمک دی سدیم فنیل فسفریک و (0.001 0.0 0.021) گرم 4-آمینوآتیپیرین ، 80 سانتی متر آب مقطر اضافه می شود ، محتویات حل می شوند ، 10 سانتی متر محلول بافر اضافه می شود ، مخلوط با آب مقطر به مارک ساخته شده و هم زده می شود. محلول بلافاصله قبل از تجزیه و تحلیل تهیه می شود.
این معرف در دمای تاریکی در دمای 5 20 20 درجه سانتیگراد بیش از 2 ساعت ذخیره نمی شود.
4.4.3. تهیه رسوب گالوانیزه مس
(0.05 ± 0.05) 150) * سولفات روی و (0.05 ± 0.05) گرم مس اسید سولفوریک به یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر اضافه می شوند ، در آب مقطر حل می شوند ، حجم آن با آب مقطر به مارک ساخته می شود و هم زده می شود. .
________________
* با اصل مطابقت دارد. - یادداشت توسط سازنده بانک اطلاعات.
4.4.4. تهیه محلول آمونیاک 3 mol / dm و تعیین غلظت آن
در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر ، 333 سانتی متر از آمونیاک را با کسر جرم 25٪ تا علامت با آب مقطر رقیق کنید.
غلظت محلول آمونیاک با استفاده از محلول اسید هیدروکلریک 0.2 mol / dm با استفاده از محلول با کسر جرم 0.1٪ متیل پرتقال به عنوان شاخص بررسی می شود. به یک فلاسک مخروطی 1 سانتی متر محلول آزمایش آمونیاک ، 50 سانتی متر آب مقطر ، 1-2 قطره نشانگر اضافه کنید ، با 0.2 mol / dm اسید هیدروکلریک مخلوط کنید و تیتراژ کنید. غلظت آمونیاک توسط فرمول تعیین می شود
غلظت مولر محلول آمونیاک مورد بررسی ، mol / dm در کجا قرار دارد.
0.2 - غلظت مولی اسید هیدروکلریک ، mol / dm؛
- میزان صرف شده برای تیتراسیون اسید هیدروکلریک ، نگاه کنید به
محلول آمونیاک در یک ظرف محکم محکم ذخیره می شود. قبل از مصرف آمونیاک ، محتوای بطری مخلوط می شود.
4.5 تحلیل
4.5.1. تهیه نمونه آزمایشی
شیر یا خامه تست 1 سانتی متر به سه لوله اضافه می شود. در یکی از لوله های شیر یا خامه ، 10 سانتی متر از محلول نمک دی سدیم از اسید فنیل فسفریک و 4-آمینوآتیپیرین را اضافه کنید ، مخلوط کنید ، در یک حمام آب یا فوق ترموستات با درجه حرارت (1 36 36) درجه سانتیگراد قرار دهید. در فواصل منظم ، به عنوان مثال 1 دقیقه ، عملیات فوق به صورت متوالی با دو لوله دیگر انجام می شود. مدت زمان قرار گرفتن در معرض هر سه لوله در یک حمام آب یا ماوراء ترموستات که توسط یک کرنومتر کنترل می شود ، 90 دقیقه است. سپس از بورت با ظرفیت 25 سانتی متر اضافه می شود یا پیپت 1 سانتی متر از رسوب دهنده سیستم روی - مس اندازه گیری می شود ، 0.6 سانتی متر از محلول با غلظت آمونیاک 3 mol / dm در همان فواصل زمانی مشابه هنگام مخلوط کردن با محلول نمک اسید فنیل فسفریک و 4-aminoantipyrine بعد از افزودن هر معرف ، به مدت 60 دقیقه در دمای 5 20 20 درجه سانتیگراد فیلتر و انکوبه شد.
4.5.2. تهیه نمونه شاهد
یک نمونه شاهد به روش زیر تهیه شده است: 10 سانتی متر هر یک از محلول نمک سدیم سدیم فنیل فسفریک و 4-آمینوآتیپیرین به سه لوله آزمایش اضافه می شود و مانند نمونه های آزمایشی در دمای (1 36 36) درجه سانتیگراد به مدت 90 دقیقه نگهداری می شوند. لوله ها از حمام آب خارج می شوند یا ماوراء ترموستات ، 1 سانتی متر از رسوب روی روی مس اضافه می شود ، 1 سانتی متر شیر یا خامه آزمایش و 0.6 سانتی متر محلول با غلظت آمونیاک 3 mol / dm (هم بزنید بعد از هر بار افزودن انجام می شود) ، فیلتر شده و به مدت 60 دقیقه نگهداری می شود. در دمای 5 20 20 درجه سانتیگراد
برای جلوگیری از ورود فنل های خارجی به محفظه لوله ها ، لوله های نوع P2 با فویل پوشانده شده ، مخلوط کردن با دو بار چرخاندن لوله ها 180 درجه و بازگشت آنها به موقعیت اصلی آنها انجام می شود.
4.6. ارزیابی نتایج
با غیرفعال کردن کامل اسید فسفاتاز در شیر یا خامه ، رنگ نمونه های آزمایشی با رنگ نمونه های شاهد تفاوت ندارد. بنابراین ، شیر و خامه در دمای 85 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 30 دقیقه ، 90 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 5 دقیقه و جوش پاستوریزه شد. این کرم در دمای 103 درجه سانتی گراد با قرار گرفتن در معرض 15-20 ثانیه در معرض عملیات حرارتی قرار گرفت.
بسته به فعالیت اسید فسفاتاز در شیر و خامه ، رنگ نمونه های آزمایشی رنگ را از کمی صورتی (اما روشن تر از رنگ نمونه های شاهد) به گیلاس تیره تغییر می دهد. بنابراین ، وجود فعالیت اسید فسفاتاز نشان دهنده عدم رعایت رژیمهای عملیات حرارتی است.
متن الکترونیکی سند
تهیه شده توسط Codex JSC و تأیید در برابر:
انتشار رسمی
شیر و لبنیات.
روشهای کلی تجزیه و تحلیل: شنبه GOST ها -
م.: انتشارات استاندارد IPK ، 2004
نسخه سند با در نظر گرفتن
تغییرات و اضافات آماده شده است
JSC "Codex"
استاندارد بین المللی
نسخه رسمی
خانه نشر IPK مسکو
UDC 631.1: 006.354 گروه H19
شیر و فراورده های شیر.
روشهای تعیین پاستوریزاسیون
ISS 67.100.10
تاریخ معرفی 01.01.76
این استاندارد در ارزیابی اثربخشی پاستوریزه کردن مواد اولیه ای که از آنها تهیه می شود ، در مورد شیر پاستوریزه ، خامه ، کره ، کره ، آب پنیر و تعیین روش هایی برای تعیین پاستوریزاسیون استفاده می کند ، همچنین پنیر ، خامه ترش ، کره ، نوشیدنی های شیر تخمیر شده و سایر محصولات لبنی.
1.1. نمونه برداری از شیر و لبنیات مطابق با GOST 26809 و GOST 13928 انجام می شود.
2.1a پراکسیداز در دمای پاستوریزه حداقل 80 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری 30-20 ثانیه غیرفعال می شود.
(علاوه بر این ، اصلاحات شماره 2).
الف - روش تعیین پراکسیداز با واکنش با هیدروکلراید رافنیلن دی آمین
2.1. جوهر روش
این روش بر پایه تجزیه پراکسید هیدروژن توسط آنزیم پراکسیداز موجود در شیر و لبنیات است.
اکسیژن فعال آزادشده در طی تجزیه پراکسید هیدروژن توسط پاراف-نایلن دی آمین اکسیده می شود تا یک ترکیب آبی ایجاد کند.
2.2. تجهیزات ، مواد و معرفها: تعادل آزمایشگاهی تحلیلی. مقیاس آزمایشگاه فنی لوله های آزمایش مطابق با GOST 23932؛
پیپت هایی با ظرفیت 2 و 5 سانتی متر 3 مطابق با GOST 29169؛
پیپت هایی با ظرفیت 5 یا 10 سانتی متر 3 با قیمت فارغ التحصیلی 0.1 سانتی متر 3 مطابق با GOST 29169؛ شیشه های تیره یا پوشش داده شده با لاک سیاه؛ فلاسک های حجمی با ظرفیت 250 و 500 سانتی متر 3 مطابق با GOST 1770؛ فلاسک های مخروطی با ظرفیت 250 سانتی متر 3 مطابق با GOST 1770؛ حمام آب با یک دستگاه گرمایشی؛
هیدروکلراید paraphenylenediamine ، محلول آبی 2٪. محلول ناپایدار است ، باید در یک بطری شیشه ای تیره با یک درپوش محکم بسته ، در یک مکان تاریک و خنک نگهداری شود. اسید سیتریک کریستالی مطابق با GOST 3652 ، x. ساعت د.ا .؛ اسید سولفوریک مطابق با GOST 4204 ، x. ساعت ، متمرکز؛ پرمنگنات پتاسیم مطابق با GOST 20490 ، 0.1 N. راه حل؛ پراکسید پزشکی هیدروژن مطابق با محلول GOST 10929 ، 0.5٪ محلول؛
فسفات سدیم کریستال را مطابق با GOST 11773 از بین برد. x ساعت یا چند ساعت
چاپ مجدد نسخه رسمی ممنوع است
* © انتشارات خانه استاندارد ، 1973
© انتشارات استاندارد IPK ، 2003
2.3 آماده سازی تجزیه و تحلیل
2.3.1. آزمایش مناسب بودن محلول 2٪ هیدروکلراید parhenhenenenamine
در هنگام استفاده از محلول 2٪ هیدروکلراید پارافیلیلن دی آمین ، که بیش از 1-2 روز ذخیره می شود ، باید از مناسب بودن آن بررسی شود. برای این کار ، در یک لوله آزمایش باید 5 سانتی متر شیر را جوشانده ، خنک شود ، 2.5 سانتی متر 3 از مخلوط بافر را اضافه کنید ، مخلوط کرده و به مدت 3-5 دقیقه در یک حمام آب با دمای آب (2 35 35) درجه سانتیگراد قرار دهید. سپس 6 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 5/0٪ و 3 قطره از محلول هیدروکلراید پارافیلیلن دی آمین را اضافه کنید ، دوباره مخلوط کرده و دوباره در یک حمام آب قرار دهید. ظاهر یک رنگ آبی تیره یا خاکستری مایل به آبی نشانگر نامناسب بودن محلول است.
2.3.2. آماده سازی بافر
97 گرم بیس کربنات سدیم فسفات و 0.65 گرم اسید سیتریک ، وزن آن با خطای بیشتر از 0.0002 گرم در آب مقطر در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 500 سانتی متر 3 حل نمی شود ، به مارک اضافه می شود و هم زده می شود. مخلوط بافر باید در یک بطری شیشه ای تیره و با یک محکم بسته نگه داشته شود.
2.3.3. تعیین پراکسید هیدروژن در یک محلول غلیظ
3-4 گرم پراکسید هیدروژن غلیظ ، با وزن حداکثر 0.01 گرم وزن ، بدون از بین رفتن به یک فلاسک حجمی با ظرفیت 250 سانتی متر 3 منتقل می شود ، با آب با مارک تنظیم می شود و مخلوط می شود. 10 سانتی متر 3 از محلول آماده شده به یک فلاسک مخروطی با ظرفیت 250 سانتی متر 3 ، 50 سانتی متر 3 آب ، 10 سانتی متر 3 اسید سولفوریک رقیق شده (1: 4) اضافه می شود و محتویات آن با 0.1 N تیتراسیون می شود. محلول پرمنگنات پتاسیم تا صورتی ، در عرض 1 دقیقه از بین نمی رود. به موازات آن ، یک آزمایش کنترل با همان شرایط و با همان مقدار معرف و آب (بدون پراکسید هیدروژن) انجام می شود.
کسر جرم پراکسید هیدروژن X ،٪ ، توسط فرمول محاسبه می شود
TL (y-y) -0.0017-25 TOO
جایی که v مقدار دقیقاً 0.1 N است محلول پرمنگنات پتاسیم برای تیتراسیون یک محلول پراکسید هیدروژن ، سانتی متر 3 استفاده می شود.
y - مقدار دقیقا 0.1 N. محلول پرمنگنات پتاسیم برای تیتراسیون کنترل ، سانتی متر 3 استفاده می شود.
0.0017 - مقدار پراکسید هیدروژن مربوط به 1 سانتی متر 3 دقیقا 0.1 N. محلول پرمنگنات پتاسیم ، g؛
t - وزن آن از پراکسید هیدروژن ، گرم.
2.3.4. تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪
برای تهیه محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ ، محلول غلیظ موجود ، بسته به محتوای پراکسید هیدروژن موجود در آن ، با آب رقیق می شود که قبلاً جوش داده شده و سرد می شود. محلول به سرعت تجزیه می شود ، بنابراین باید در مقادیر کمی تهیه شود.
محلول ها باید در یک بطری شیشه ای تیره و در یک مکان خنک نگهداری شوند.
2.4 تحلیل
محصول مورد آزمایش و آب مقطر اندازه گیری شده یا درون یک لوله آزمایش اندازه گیری می شود.
مقدار آب مقطر و محصول مورد تجزیه و تحلیل باید مطابق با آنچه در جدول ذکر شده است مطابقت داشته باشد. 1
جدول 1
نوشیدنی های شیر ترش با پرکننده های میوه از طریق فیلتر کاغذی فیلتر می شوند. پاستوریزاسیون با واکنش فیلتراسیون با نشاسته یدید پتاسیم تعیین می شود.
برای به دست آوردن 2-3 سانتی متر 3 پلاسما روغن ، 50 گرم کره در دمای بیش از 50 درجه سانتیگراد ذوب می شود ، سپس خنک می شود و لایه یخ زده چربی برداشته می شود.
پس از افزودن آب ، محصولات مورد تجزیه و تحلیل با میله شیشه ای کاملاً مالیده می شوند. سپس 2.5 سانتی متر 3 از مخلوط بافر را با یک مقدار مشخص شده از محصول و آب درون یک لوله آزمایش ریخته و کاملاً با میله شیشه ای مخلوط کرده و در یک حمام آب با دمای آب (2 35 35) درجه سانتیگراد قرار می دهیم ، در آنجا برای 3-5 دقیقه نگه داشته می شود تا محتویات لوله آزمایش این را بپذیرند. دما سپس 6 قطره از محلول 5/0٪ پراکسید هیدروژن و 3 قطره از محلول هیدروکلراید paraphenylenediamine را اضافه کنید ، محتویات لوله را با حرکات چرخشی بعد از اضافه کردن هر معرف مخلوط کنید. پس از آن ، لوله مجددا در حمام آب قرار می گیرد و تغییر رنگ مایع مشاهده می شود.
2.5. ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم پراکسیداز در شیر و لبنیات ، محتوای محتوای لوله تغییر نمی کند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند.
با حضور پراکسیداز در شیر ، خامه ، کره ، محتویات لوله ها به رنگ آبی تیره می شود. در حضور پراکسیداز در فرآورده های شیر تخمیر شده و روغن خامه ترش ، محتویات لوله ها رنگ خاکستری بنفش را به دست می آورند و به تدریج به رنگ آبی تیره تبدیل می شوند. بنابراین ، شیر و لبنیات در دمای کمتر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده بودند ، یا با محصولات غیرمستقیم مخلوط شدند. حساسیت روش اجازه می دهد تا علاوه بر این حداقل 5٪ از محصولات لبنی غیر پاستوریزه به پاستوریزه شدن نیز شناسایی شود.
ب - تعیین پراکسیداز توسط واکنش با نشاسته پتاسیم
2.6. جوهر روش
این روش بر پایه تجزیه پراکسید هیدروژن توسط آنزیم پراکسیداز موجود در شیر و لبنیات است. اکسیژن فعال که در هنگام تجزیه پراکسید هیدروژن آزاد می شود ، یدید پتاسیم را اکسید می کند و ید را آزاد می کند ، که ترکیبات آبی با نشاسته را تشکیل می دهد.
2.7 تجهیزات ، مواد و رجنتس: تجهیزات مطابق با و. 2.2؛
پراکسید پزشکی هیدروژن مطابق با محلول GOST 10929 ، 0.5٪ محلول؛
نشاسته سیب زمینی مطابق با GOST 7699؛
یدید پتاسیم مطابق با GOST 4232 ، x. ساعت یا ساعت؛
آب مقطر مطابق با GOST 6709؛
قیف شیشه ای B-56-80 HU-I مطابق با GOST 25336؛
فیلترهای کاغذ با قطر 11 سانتی متر.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 4).
2.8 آماده سازی تجزیه و تحلیل
2AL تهیه 5/0٪ پراکسید هیدروژن پاپ. 2.3.4.
2.8.2. تهیه نشاسته یدید پتاسیم
3 گرم نشاسته با خطای بیش از 0.01 گرم وزن داده می شود و با 5-10 سانتی متر 3 آب سرد مقطر مخلوط می شود تا جرم همگن حاصل شود. به طور جداگانه ، 100 سانتی متر 3 آب مقطر در یک فلاسک به جوش آورده می شود و با همزن مداوم ، آب به نشاسته رقیق شده اضافه می شود و از تشکیل توده ها جلوگیری می کند. محلول حاصل به جوش آورده شد. پس از خنک شدن ، 3 گرم یدید پتاسیم به محلول نشاسته اضافه می شود ، هم بزنید تا بلورهای یدید پتاسیم حل شوند.
محلول نشاسته ید پتاسیم یک معرف ناپایدار است ، بنابراین باید آن را به مقدار کمی تهیه کرده و در بیش از دو روز در یک مکان تاریک و خنک نگهداری کنید.
2.8.3. آزمایش مناسب بودن محلول نشاسته یدید پتاسیم
برای تعیین مناسب بودن محلول نشاسته ید پتاسیم ، که بیش از دو روز ذخیره می شود ، باید قبل از استفاده بررسی شود. برای انجام این کار ، در یک لوله آزمایش باید 5 سانتی متر شیر 3 جوشانده ، خنک شود ، 5 قطره از محلول نشاسته یدید پتاسیم و 5 قطره از یک محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ را اضافه کرده و مخلوط کنید. ظاهر یک رنگ آبی تیره یا خاکستری مایل به آبی نشانگر نامناسب بودن محلول است.
2.8.4. به جای نشاسته ید-پتاسیم ، مجاز به استفاده از محلول نشاسته 1٪ نشاسته و 10٪ محلول یدید پتاسیم است.
2.9 تحلیل
اندازه گیری یا توزین محصولات و آبهای مورد بررسی و تهیه پلاسمای روغن طبق بند 2.4 انجام می شود.
5 قطره از محلول نشاسته یدید پتاسیم و 5 قطره محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ در لوله آزمایش با مقدار مشخص شده محصول و آب ریخته می شود و محتوای لوله پس از اضافه کردن هر معرف با حرکات دوار مخلوط می شود. سپس با تغییر رنگ ، میزان پراکسیداز را تعیین کنید.
اگر از محلول یدید نشاسته و پتاسیم به طور جداگانه استفاده می شود ، به شرح زیر عمل کنید: 0.5 سانتی متر 3 از محلول 1٪ نشاسته ، 2 قطره از محلول یدید 10٪ با محصولات تهیه شده همانطور که در بخش 2.4 توضیح داده شده است در هر لوله ریخته می شود. پتاسیم و 5 قطره از محلول پراکسید هیدروژن 0.5٪ ، محتویات لوله ها را بعد از اضافه کردن هر معرف مخلوط کنید ، سپس با تغییر رنگ ، میزان پراکسیداز را تعیین کنید.
2.10 ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم پراکسیداز در شیر و لبنیات ، محتوای محتوای لوله تغییر نخواهد کرد. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند.
با حضور پراکسیداز در شیر ، خامه ، کره ، محتویات لوله ها به رنگ آبی تیره می شود. با حضور پراکسیداز در فرآورده های شیر تخمیر شده و روغن خامه ترش ، محتویات لوله ها در بیش از 2 دقیقه یک رنگ خاکستری مایل به آبی به دست می آورند ، که به تدریج به رنگ آبی تیره تبدیل می شوند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای کمتر از 80 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده بودند ، یا با محصولات لبنی غیرمستقیم مخلوط شدند. بروز رنگ در لوله های آزمایش بیش از 2 دقیقه پس از افزودن نشاسته یدید پتاسیم و پراکسید هیدروژن نشان دهنده عدم پاستوریزاسیون نیست ، زیرا می تواند با تجزیه مواد معرف ایجاد شود.
حساسیت این روش امکان افزودن حداقل 5٪ از محصولات لبنی غیرپاستوریزه را به پاستوریزه شدن و همچنین برای نوشیدنی هایی که دارای پرکننده میوه و توت -0.5٪ هستند امکان پذیر است.
3.1a فسفاتاز در دمای پاستوریزه حداقل 63 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری 30 دقیقه غیرفعال می شود.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2).
الف) تعیین فسفاتاز توسط واکنش با 4-آمینوآنتیپیرین (روش داوری)
3.1 جوهر روش
این روش بر پایه هیدرولیز نمک دی سدیم از فنیل فسفوریک اسید با آنزیم فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات است. فنل آزاد آزاد شده در حین هیدرولیز با حضور یک ماده اکسید کننده ، یک رنگ صورتی را با 4 آمینوآتیپیرین ایجاد می کند.
3.2 تجهیزات ، مواد و معرفها: تعادل آزمایشگاهی تحلیلی. مقیاس آزمایشگاه فنی
لوله های شیشه ای مطابق با GOST 23932 ، اندازه 16 x 150 میلی متر؛ اندازه گیری پیپت ها با ظرفیت 5 سانتی متر 3 مطابق با GOST 29169؛ ملات چینی با گاستیل مطابق با GOST 9147؛ فلاسک مخروطی با ظرفیت 100 سانتی متر 3 مطابق با GOST 1770؛ یک استوانه شیشه ای با ظرفیت 25 سانتی متر 3 مطابق با GOST 1770؛ حمام آب؛
کلرید آمونیوم مطابق با GOST 3773 ، x. ساعت؛ آمونیاک آبی مطابق با GOST 3760 ، 25٪ ، درجه تحلیلی.
فنیل فسفوریک اسید سدیم سدیم دو آب - طبق اسناد فنی فعلی ، به روش مقرر تصویب می شود.
4-aminoantipyrine ، ح.
سولفات روی طبق GOST 4174 ، x. ساعت؛ سولفات مس مطابق با GOST 4165 ، x. ساعت؛ اتیل اتر؛
آب مقطر مطابق با GOST 6709؛
شیشه قیف В 56-80 ХУ-1 GOST 25336 ، فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر 3 مطابق با GOST 1770؛
فیلترهای کاغذ با قطر 11 سانتی متر؛
کاغذ نشانگر جهانی pH 1-10؛
هیدروکسید سدیم مطابق با GOST 4328 ، x. ح. یا ح.چ. ، 1 ن. راه حل؛
کربن فعال
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 3 ، 4).
3.3 آماده سازی تجزیه و تحلیل
شیر پاستوریزه ، خامه ، نوشیدنی های شیر ترش ، ماست برای تهیه آنالیز نیاز به آماده سازی اضافی ندارد. پنیر کلم و خامه ترش را باید با آب مقطر رقیق کرد. برای این کار ، 1 گرم پنیر و خامه ترش در یک لوله آزمایش قرار داده می شود و با 2 سانتی متر 3 آب مقطر کاملاً مخلوط می شود.
نوشیدنی های شیر ترش همراه با میوه و میوه های توت باید از طریق فیلتر کاغذی با کربن فعال (2 گرم کربن فعال در هر 25 سانتی متر 3 محصول) فیلتر شوند. سرم و فیلترهای نوشیدنی های شیر تخمیر شده با مواد تحریک کننده میوه و توت باید خنثی شوند. محلول هیدروکسید سدیم به pH 6 ، توسط یک کاغذ نشانگر جهانی کنترل می کند. (نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 4).
3.3.1. تهیه محلول بافر پایه (pH 10 + 0.2)
40 گرم کلرید آمونیوم (NH 4 C1) ، با خطای بیش از 0.01 گرم ، در 100-200 سانتی متر 3 آب مقطر حل می شود ، 348 cm 3 از آمونیاک آبی 25٪ (NH 4 OH) اضافه می شود و تنظیم می شود تا 1 dm 3 آب مقطر.
3.3.2. تهیه بستر تهیه محلول A
1.25 گرم نمک دی سدیم از فنیل فسفوریک اسید (C 6H 5 0 4 PNa 2) ، با خطای بیش از 0،0002 گرم وزن داشت و در 100 سانتی متر 3 محلول اصلی بافر حل شد.
تهیه محلول B
0.8 گرم از 4 آمینوآنتیپیرین (C n H n در 2 NH2) ، با خطای بیش از 0،0002 گرم وزن ، در 900 سانتی متر 3 آب مقطر حل می شود.
محلولهای A و B باید بی رنگ بوده و در بطری های شیشه ای تیره در یخچال نگهداری شوند. ماندگاری بیشتر از 1 ماه نیست. راه حل های زرد برای کار مناسب نیست.
محلول کار بستر بلافاصله قبل از تعیین واکنش با مخلوط کردن محلولهای A و B تهیه می شود (1: 9). محلول کار به مدت 8 ساعت هنگام نگهداری در بطری شیشه ای تیره مناسب است.
در صورت لزوم ، نمک سدیم سدیم فنیل فسفریک با شستن با اتیل اتر از فنل آزاد خالص می شود تا اینکه فنل به طور کامل برداشته شود. معرف خشک در دمای اتاق تحت پیش نویس.
3.3.3. تهیه رسوب گالوانیزه مس
30 گرم سولفات روی (ZnS04 B 7Hg O) و 6 گرم سولفات مس (CuS0 4 5Hg O) با وزن بیش از 0.01 گرم وزن ندارند و در 1 لیتر آب مقطر حل می شوند.
3.3.4. پخت و پز 1 ن. محلول هیدروکسید سدیم
40 گرم هیدروکسید سدیم کریستالی را با خطای بیش از 0.1 گرم وزن نکشید و در آب مقطر در یک فلاسک حجمی 1 dm 3 حل کنید و حجم آن را به علامت منتقل کنید.
3.3.5. ذغال فعال در قرص ها در ملات آسیاب می شود.
3.4 تحلیل
به 3 سانتی متر 3 شیر ، خامه ، کفیر ، ماست ، کشک یا از قبل آماده شده برای آنالیز توسط و. محصولات 3.3 به 2 cm 3 محلول کار بستر اضافه می کنند. سپس محتویات لوله مخلوط شده و در یک حمام آب گرم شده به مدت 40 دقیقه تا 40-45 درجه سانتیگراد قرار می گیرد. 5 سانتی متر 3 رسوبگر روی روی لوله آزمایش شده که از حمام آب جدا شده است ، اضافه می شود ، محتویات لوله آزمایش کاملاً مخلوط می شود و در دمای 40-45 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه دوباره در حمام آب قرار می گیرد. بیرون کشیدن
یک لوله آزمایش از حمام ، یک آزمایش بصری از محتویات لوله آزمایش محصول آزمایش با آزمایش کنترل مقایسه کنید.
آزمایش کنترل برای همه محصولات یک واکنش مشابه با شیر آب پز است. اگر آزمایش کنترل با شیر آب پز یک رنگ کمی صورتی ایجاد کند - فنیل فسفات دی سدیم منوط به تصفیه اضافی توسط و. 3.3.2.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 4).
3.5. ارزیابی نتایج
3.5.1. در صورت عدم وجود آنزیم فسفاتاز در شیر و فراورده های لبنی ، رنگ محتوای لوله (محلول جدا شده از پروتئین رسوب شده) بی رنگ است ، یعنی شبیه به محتویات لوله های آزمایش کنترل نیست. در نتیجه ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 63 J پاستوریزه شدند.
در صورت وجود فسفاتاز در شیر و فراورده های لبنی ، محتوای لوله ها (محلول) به رنگ صورتی تا قرمز تیره است. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دماهای زیر 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده و یا با محصولات لبنی غیرمستقیم مخلوط شدند.
هنگام ارزیابی واکنش ، فقط رنگ مورد توجه قرار می گیرد ، اما نه شفافیت راه حل.
حساسیت این روش باعث می شود علاوه بر این ، محصولات لبنی نشده و غیره را به آنهایی که پاستوریزه شده اند نیز ردیابی کنید: 0.3٪ در شیر ، خامه ، نوشیدنی های شیر ترش و 0.5٪ در پنیر و خامه ترش و 1٪ در نوشیدنی هایی با میوه و توت فرنگی و آب پنیر.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 4).
3.5.2. پنیر کلوچه و خامه ترش برای پاستوریزه کردن مواد اولیه - شیر و خامه توسط فسفاتاز تعیین می شود حداکثر هفت روز از زمان کویر ، خامه ترش - حداکثر بعد از پنج روز.
تعیین پاستوریزاسیون در انواع لبنیات ، نوشیدنی های خامه ای و فراورده های پنیر با پرکننده ها و محصولات حاصل از کشک باید با کنترل مواد اولیه (شیر ، خامه ، پنیر ، آب پنیر) مطابق با Sec انجام شود. 3 A.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2 ، 4).
ب - تعیین فسفاتاز با واکنش با سدیم فنل فتالاتین فسفات
3.6. جوهر روش
این روش بر پایه هیدرولیز فنل فتالاتین سدیم فسفات توسط آنزیم فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات است. فنول فتالین آزاد شده در حین هیدرولیز در یک محیط قلیایی ، رنگ صورتی را نشان می دهد.
3.7 تجهیزات ، مواد و معرفها:
ادعا مطابق ادعای 2.2.
آمونیاک آبی با توجه به GOST 3760 ، درجه تحلیلی ، 1 n. راه حل؛
کلرید آمونیوم مطابق با GOST 3773 ، x. ح. یا ح.چ. ، 1 ن. راه حل؛
مخلوط بافر آمونیاک؛
پودر فسفات فنل فتالاتین سدیم ، محلول 10 یا 0.1.
آب مقطر مطابق با GOST 6709؛
لوله های شیشه ای مطابق با GOST 23932 از شیشه های بی رنگ با برچسب های چاپ شده در حجم
اندازه گیری پیپت ها با ظرفیت 1 و 2 سانتی متر 3 مطابق با GOST 29169؛
شاخه های لاستیکی.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2).
3.8 آماده سازی تجزیه و تحلیل
3.8.1. تهیه مخلوط بافر آمونیاک
80 cm 3 1 n. محلول آمونیاک با 20 cm 3 1 N مخلوط می شود. محلول کلرید آمونیوم (pH 9.8).
3.8.2. تهیه محلول فنل فتالین فسفات سدیم 0.1٪.
1/0 گرم پودر فنل فتالاتین سدیم فسفات ، وزن شده با خطای بیش از 0،0002 گرم ، در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 100 سانتی متر 3 با مقدار کمی مخلوط بافر حل می شود ، سپس مخلوط بافر را به آن اضافه کرده و مخلوط می کنیم.
3.9 تحلیل
محصول تجزیه و تحلیل ، آب مقطر و معرف در لوله آزمایش اندازه گیری می شود. مقدار محصول مورد تجزیه و تحلیل ، آب مقطر و معرف باید مطابق با مقدار ذکر شده در جدول باشد. 2
جدول 2
پس از افزودن آب مقطر و معرف ، محتویات لوله با یک درپوش بسته می شوند و می لرزند.
سپس لوله در یک حمام آب با دمای آب از 40 تا 45 درجه سانتیگراد قرار می گیرد و رنگ محتویات لوله را بعد از 10 دقیقه و بعد از 1 ساعت مشخص می کند.
3.10 ارزیابی نتایج
در صورت عدم وجود آنزیم فسفاتاز در شیر و لبنیات ، محتوای محتوای لوله تغییر نمی کند. بنابراین ، شیر و فراورده های لبنی در دمای پایین تر از 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه شدند. با وجود فسفاتاز موجود در شیر و لبنیات ، محتویات لوله از صورتی روشن به صورتی روشن تبدیل می شود. بنابراین ، شیر و لبنیات در دمای زیر 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه یا پاستوریزه نشده بودند ، یا با محصولات غیرمستقیم مخلوط شدند.
حساسیت روش به شما امکان می دهد علاوه بر این حداقل 2٪ از محصولات لبنی غیرمستقیم را به پاستوریزه شدن نیز تشخیص دهید.
تعیین پاستوریزه کردن انواع لبنیات ، نوشیدنی های خامه ای باید با کنترل مواد اولیه (شیر ، خامه) مطابق با Sec انجام شود. 3 ب.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 2).
4- روش مشخص کردن فسفاتاز اسید
4.1 فسفاتاز اسید در دمای پاستوریزه کردن شیر و خامه 85 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 30 دقیقه ، 90 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 5 دقیقه و جوش غیرفعال می شود. عملیات حرارتی کرم 103 درجه سانتیگراد با قرار گرفتن در معرض 15-20 ثانیه.
روش تعیین اسید فسفاتاز برای کنترل اثربخشی عملیات حرارتی طراحی شده است.
4.2. جوهر روش
این روش براساس خاصیت اسید فسفاتاز برای كاتالیزاسیون در pH (0.05 4. 4.00) هیدرولیز نمك دی سدیم از اسید فنیل فسفوریك اسید به منظور ایجاد فنل و سدیم فسفات است. فنل با 4 آمینوآنتیپیرین ، هنگامی که یک رسوب کننده سیستم مس و روی اضافه می شود ، در شرایط واکنش قلیایی ، یک ترکیب رنگی را تشکیل می دهد که شدت رنگ را از صورتی ضعیف به گیلاس تیره (بسته به غلظت فنل) تغییر می دهد. تفاوت در شدت رنگ نمونه های آزمایش و کنترل میزان فعالیت اسید فسفاتاز (چه رژیم های عملیات حرارتی مشاهده شود) را تعیین می کند.
4.3 تجهیزات ، مواد و رجنتس
آنالایزر پتانسیومتر با دامنه اندازه گیری 5/4 واحد. با توجه به GOST 19881 یا GOST 27987 ، pH را با دقت 0.05 measure اندازه گیری می کند.
حمام آب با گرمایش قابل تنظیم یا فوق ترموستات ، کنترل دما از 25 تا 50 درجه سانتیگراد ، با دقت 1 درجه سانتیگراد را فراهم می کند.
بورتس 3-1-25-0.1؛ 3-2-25-0.1؛ 3-1-50-0.1؛ 3-2-50-0.1 GOST 29251.
مقیاس های آزمایشگاهی برای مصارف عمومی ، کلاس 2 درجه دقت با بیشترین حد وزن 200 گرم مطابق با GOST 24104 *.
مقیاس های آزمایشگاهی برای مصارف عمومی ، کلاس دقت 4 با بیشترین حد وزن 500 گرم مطابق با GOST 24104.
قیف B-56-80 XC GOST 25336.
قطره ای 2-50 XC GOST 25336.
فلاسک K n 2-250-34؛ 2-250-40؛ 2-250-50 XC GOST 25336.
فلاسکهای 1-50-2؛ 1-100-2؛ 1-250-2؛ 1-500-2؛ 1-1000-2؛ 2-100-2؛ 2-50-2؛ 2-250-2؛ 2-500-2؛ 2-1000-2 GOST 1770.
پیپت 4-1-1؛ 4-1-2؛ 5-1-1؛ 5-1-2؛ 6-1-5؛ 6-1-10؛ 7-1-5؛ 7-1-10 GOST 29169.
لوله های آزمایشگاهی P 4-15-14 / 23 ، P 2-16-150 XC GOST 25336.
کرنومتر توسط سند نظارتی.
سیلندرهای 1-50؛ 1-100؛ 1-500؛ 3-50؛ 3-100 GOST 1770.
قفسه لوله آزمایش.
کاغذ را مطابق با GOST 12026 فیلتر کنید.
فویل آلومینیومی برای بسته بندی مطابق با GOST 745.
4-آمینوسیپیرین ، ح.
محلول آبی 25٪ آمونیاک مطابق با GOST 3760 ، p.a.
آب مقطر مطابق با GOST 6709.
اسید هیدروکلریک ، 0.1 mol / dm 3 ، کانال ثابت.
اسید استیک یخبندان مطابق با GOST 61 ، x. ساعت
مس اسید سولفوریک 5 آب مطابق با GOST 4165 ، h.
متیل پرتقال ، نشانگر با کسر جرم 0.1٪.
هیدروکسید سدیم مطابق با GOST 4328 ، x. ساعت
2-آب نمک سدیم دی اکسید فنیل فسفریک 2 ساعت ، ساعت
7 سولفات روی مطابق با GOST 4174 ، h.
4.4 آماده سازی تجزیه و تحلیل
4.4.1. آماده سازی بافر
در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر 3 ، 72 سانتی متر 3 اسید استیک یخبندان اضافه می شود ، با آب مقطر به مارک تنظیم می شود و مخلوط می شود. سپس با محلول غلیظ هیدروکسید سدیم به pH (0.05 3. 78/3) قلیایی می شود.
4.4.2. تهیه و ذخیره سازی محلول نمک سدیم سدیم فنیل فسفوریک اسید و 4-آمینو ضدپیرین.
در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 100 سانتی متر 3 ، (0.001 0.3 0.300) گرم نمک دی سدیم اسید فنیل فسفوریک و (0.001 ± 0.021 g) گرم 4-aminoantipyrine ، 80 سانتی متر 3 آب مقطر اضافه می شود ، محتویات حل می شوند ، 10 سانتی متر 3 محلول بافر اضافه می شود ، مخلوط با آب مقطر ساخته می شود تا علامت گذاری شود و مخلوط کنید محلول بلافاصله قبل از تجزیه و تحلیل تهیه می شود.
این معرف در دمای تاریکی در دمای 5 20 20 درجه سانتیگراد بیش از 2 ساعت ذخیره نمی شود.
4.4.3. تهیه رسوب گالوانیزه مس
درون یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر 3 اسید سولفوریک اسید (0.05 150 150.00) اسید سولفوریک و (0.05 .00 30.00) گرم مس اسید سولفوریک ، حل شده در آب مقطر ، حجم را با آب مقطر به آن اضافه کرده و مخلوط کنید. .
4.4.4. تهیه محلول آمونیاک 3 mol / dm 3 و تعیین غلظت آن
در یک فلاسک حجمی با ظرفیت 1000 سانتی متر 3 آمونیاک 333 سانتی متر 3 با کسر جرم 25٪ به علامت گذاری با آب مقطر رقیق می شوید.
غلظت محلول آمونیاک با محلول اسید هیدروکلریک 0.2 mol / dm 3 با استفاده از محلول با کسری جرم 0.1٪ متیل پرتقال به عنوان شاخص بررسی می شود. به یک فلاسک مخروطی 1 سانتی متر 3 از محلول آزمایش آمونیاک ، 50 سانتی متر 3 آب مقطر ، 1-2 قطره نشانگر اضافه کنید ، با 0.2 mol / dm 3 اسید هیدروکلریک مخلوط کنید و تیتراژ کنید. غلظت آمونیاک توسط فرمول تعیین می شود
که در آن K غلظت مولر محلول تست آمونیاک ، mol / DM3 است.
0.2 - غلظت مولی اسید هیدروکلریک ، mol / dm 3؛
الف ، میزان مصرف شده برای تیتراسیون اسید هیدروکلریک ، سانتی متر 3 است.
محلول آمونیاک در یک ظرف محکم محکم ذخیره می شود. قبل از مصرف آمونیاک ، محتوای بطری مخلوط می شود.
4.5 تحلیل
4.5.1. تهیه نمونه آزمایشی
شیر یا خامه آزمایش 1 سانتی متر 3 در سه لوله کمک می کند. در یکی از لوله های شیر یا خامه 10 cm 3 محلول نمک دی سدیم از اسید فنیل فسفوریک و 4-aminoanti- اضافه کنید
پیرین ، مخلوط شده ، در حمام آب یا ماوراء ترموستات با دمای 1 36 36 درجه سانتیگراد قرار می گیرد. در فواصل منظم ، به عنوان مثال 1 دقیقه ، عملیات فوق به صورت متوالی با دو لوله دیگر انجام می شود. مدت زمان قرار گرفتن در معرض هر سه لوله در یک حمام آب یا ماوراء ترموستات که توسط یک کرنومتر کنترل می شود ، 90 دقیقه است. سپس از بورت با ظرفیت 25 سانتی متر 3 یا پیپت 1 سانتی متر 3 از رسوب روی و مس اندازه گیری می شود ، 0.6 سانتی متر 3 از محلول با غلظت آمونیاک 3 mol / dm 3 در همان بازه های زمانی همزمان با مخلوط نمک فنیل فسفوریک اسید اندازه گیری می شود و 4-آمینانسیپیرین ، که پس از افزودن هر معرف ، هم بزنید ، به مدت 60 دقیقه در دمای 5 20 20 درجه سانتیگراد فیلتر و انکوبه شوید.
4.5.2. تهیه نمونه شاهد
یک نمونه شاهد به روش زیر تهیه شده است: 10 سانتی متر 3 از محلول نمک سدیم سدیم فنیل فسفوریک اسید و 4-آمینوآتیپیرین در سه لوله آزمایش وارد می شود و مانند نمونه های آزمایشی در دمای (1 36 36) درجه سانتیگراد به مدت 90 دقیقه نگهداری می شوند. لوله ها از حمام آب یا فوق ترموستات خارج می شوند ، 1 سانتی متر 3 از رسوب دهنده سیستم روی-مس ، 1 سانتی متر 3 شیر یا خامه تست و 0.6 cm 3 محلول با غلظت آمونیاک 3 mol / dm 3 اضافه کنید (هم بزنید بعد از هر بار اضافه شده) ، فیلتر شود. و به مدت 60 دقیقه در دمای 5 20 20 درجه سانتیگراد انکوبه شوند.
برای جلوگیری از ورود فنل های خارجی به محفظه لوله ها ، لوله های نوع P2 با فویل پوشانده شده ، مخلوط کردن با دو بار چرخاندن لوله ها 180 درجه و بازگشت آنها به موقعیت اصلی آنها انجام می شود.
4.6. ارزیابی نتایج
با غیرفعال کردن کامل اسید فسفاتاز در شیر یا خامه ، رنگ نمونه های آزمایشی با رنگ نمونه های شاهد تفاوت ندارد. بنابراین ، شیر و خامه در دمای 85 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 30 دقیقه ، 90 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری حداقل 5 دقیقه و جوش پاستوریزه شد. این کرم در دمای 103 درجه سانتی گراد با قرار گرفتن در معرض 15-20 ثانیه در معرض عملیات حرارتی قرار گرفت.
بسته به فعالیت اسید فسفاتاز در شیر و خامه ، رنگ نمونه های آزمایشی رنگ را از کمی صورتی (اما روشن تر از رنگ نمونه های شاهد) به گیلاس تیره تغییر می دهد. بنابراین ، وجود فعالیت اسید فسفاتاز نشان دهنده عدم رعایت رژیمهای عملیات حرارتی است.
اطلاعات اطلاعات
1. توسعه یافته و معرفی شده توسط کمیته کشاورزی و صنعتی ایالتی اتحاد جماهیر شوروی
توسعه دهندگان
A.P. Patratius؛ V. A. Serebrennikova؛ دکترای G.A. Eresko فناوری علوم؛ A. N. Starcheva ، دکتری فناوری علوم؛ N. Ya. Yatsyuta ، E.K. Zhurakhovskaya؛ P.V. بیل؛ A. G. Anatskaya؛ یو. یو سواریدنکو؛ شمع فناوری علوم؛ M. I. Danilov؛ N.I. Kretschman؛ A.I. Gudonis؛ K. D. Butkus؛ V. B. Saykauskene ،
شمع فناوری علوم
2. تأیید و معرفی شده توسط قطعنامه های کمیته دولتی اتحاد جماهیر شوروی در مورد استانداردهای 28 فوریه 73 شماره 503
3. جایگزینی GOST 3623-56
4- اسناد مربوط به فن آوري تكميل كننده
|
شماره مورد |
شماره مورد |
||
|
GOST 10929-76 | |||
|
GOST 11773-76 | |||
|
GOST 1770-74 |
GOST 12026-76 | ||
|
GOST 3652-69 |
GOST 13928-84 | ||
|
GOST 3760-79 |
GOST 19881-74 | ||
|
GOST 3773-72 |
GOST 20490-75 | ||
|
GOST 4165-78 |
GOST 23932-90 | ||
|
GOST 4174-77 |
GOST 24104-88 | ||
|
GOST 4204-77 |
GOST 25336-82 | ||
|
GOST 4232-74 |
GOST 26809-86 | ||
|
GOST 4328-77 |
GOST 27987-88 | ||
|
GOST 6709-72 |
2.2, 2.7, 3.2, 3.7, 4.3 |
GOST 29169-91 |
2.2, 3.2, 3.7, 4.3 |
|
GOST 7699-78 |
GOST 29251-91 | ||
|
GOST 9147-80 |
5- مدت اعتبار طبق پروتکل شماره 3-93 شورای بین المللی استاندارد ، اندازه گیری و صدور گواهینامه برداشته شده است (IUS 5-6-93)
6. ویرایش (آوریل 2003) با اصلاحات شماره 2 ، 3 ، 4 ، 5 ، مصوب اکتبر 1978 ، اوت 1980 ، ژوئن 1982 ، سپتامبر 1989 (IMS 11-78 ، 10-80 ، 9-82 ، 1-90)
ویرایشگر T.P. ویرایشگر فنی Shashina N. S. Grishanova اصلاح کننده A. S. Chernousova طرح بندی رایانه L. A. مدور
اد اشخاص شماره 02354 از 07/14/2000. در تاریخ 29 مه 2003 به چاپ رسید. خوب اجاق گاز ل 1.40 انتشارات خانه ل 1.20 گردش 115ex.
ج 10779. ذاک. 483
انتشارات استاندارد IPK ، مسکو ، کلودزی هر 14 ، مسکو ، 107076 ایمیل: تایپ شده در چاپخانه کالوگا از استانداردهای رایانه ای.
شعبه انتشارات IPK از نوع استاندارد. چاپگر مسکو ، 105062 مسکو ، لیالین در هر ، 6.
1) نمونه لاکتوآلبومین.برای تعیین پاستوریزاسیون شیر در دمای بالاتر از 80 درجه سانتیگراد استفاده می شود. در این دما ، آلبومین منعقد می شود و در سرم شیر قابل تشخیص نیست.
تکنیک تعریف. 3-5 میلی لیتر از فیلتر سرم را درون یک لوله آزمایش بریزید ، ابتدا کدورت و سپس انعقاد آلبومین و گلوبولین را بجوشانید و مشاهده کنید. وجود این پروتئین ها نشانگر عدم پاستوریزه شدن شیر است.
2) آزمایش پراکسیداز. برای تشخیص پاستوریزه کردن شیر در دمای بالاتر از 80 درجه سانتیگراد یا در دمای 75 درجه سانتیگراد با مدت زمان نگهداری 10 دقیقه استفاده می شود ، در این دما پراکسیداز غیرفعال می شود. این روش براساس تجزیه پراکسید هیدروژن توسط آنزیم پراکسیداز موجود در شیر خام است. اکسیژن فعال که در هنگام تجزیه پراکسید هیدروژن آزاد می شود ، یدید پتاسیم را اکسید می کند و ید را آزاد می کند ، که ترکیبات آبی با نشاسته را تشکیل می دهد.
نشاسته پراکسیداز ð H 2 O 2 ð O ð KJ ð J +
آنزیم پراکسید آنزیم
شیر خام هیدروژن اکسیژن آبی
در شیر خام ، نشاسته آبی شدیدتر است. در شیر گرم شده تا 60-70 درجه سانتیگراد ، رنگ آمیزی به رنگ آبی کمرنگ (مایل به خاکستری) خواهد بود ، در حالی که در شیر گرم شده تا 75-80 درجه سانتیگراد ، تغییر رنگ رخ نمی دهد ، زیرا پراکسیداز کاملاً در این دما از بین می رود. باید در نظر داشت که حتی در شیر جوشانده مدتی پس از افزودن معرفها ، ممکن است یک رنگ آبی کم رنگ به دلیل تجزیه تدریجی پراکسید هیدروژن و بدون قرار گرفتن در معرض آنزیم ظاهر شود.
برای بررسی کیفیت معرفها ، تعیین كنترل با شیر آب پز انجام می شود. با استفاده از این روش می توان فهمید که 5٪ یا بیشتر شیر غیرمستقیم به شیر پاستوریزه اضافه می شود.
در صورت نقض رژیم پاستوریزاسیون یا در دمای پاستوریزاسیون کم (63-72 درجه سانتیگراد) ، و همچنین در صورت وجود مخلوط شیر شیرین نشده (5-10٪) ، محتویات لوله به سرعت از آب کبود به آبی تیره تبدیل می شود. حسابداری برای واکنش بیش از دو دقیقه پس از افزودن معرفها به شیر انجام می شود. رنگ آمیزی محتویات لوله آزمایش پس از 2 دقیقه مورد توجه قرار نمی گیرد ، زیرا تجزیه بعدی معرفها (پراکسید هیدروژن) می تواند باعث رنگ آمیزی شیر حتی آب پز شود.
تکنیک تعریف. در یک لوله آزمایش ، 5 قطره از محلول نشاسته ید پتاسیم و 5 قطره از محلول 0.5٪ پراکسید هیدروژن را به 5 میلی لیتر شیر تست اضافه کنید و کاملاً مخلوط کنید.
رنگ آمیزی شدید آبی نشان دهنده وجود پراکسیداز در شیر - شیر خام است. رنگ آمیزی رنگ آبی روشن نشان دهنده تخریب جزئی آنزیم تحت تأثیر دما است ، شیر در پاستوریزه در محدوده 65-70 درجه سانتیگراد قرار می گیرد. عدم رنگ آمیزی برای یک دقیقه پس از افزودن معرفها نشانه عدم وجود پراکسیداز در شیر است ، شیر در دمای بالاتر از 80 درجه سانتیگراد یا در 75 درجه پاستوریزه می شود. با سرعت شاتر 10 دقیقه.
3) آزمایش فسفاتاز. برای تعیین اثربخشی پاستوریزاسیون استفاده می شود. واکنش به فسفاتاز باعث می شود که افزودن شیر خام پاستوریزه به میزان 2٪ یا بیشتر تعیین شود.
فسفاتاز هنگامی که حداقل به مدت 30 دقیقه در دمای 63 درجه سانتیگراد گرم می شود کاملاً از بین می رود (حتی گرم کردن 20 دقیقه در 63 درجه سانتیگراد آنزیم را به طور کامل از بین نمی برد) یا در دمای بالاتر از 72 درجه سانتیگراد با قرار گرفتن در معرض 20 ثانیه.
روش تعیین فسفاتاز بر اساس این واقعیت است که فسفاتاز فسفر را از فسفات سدیم فنل فتالاتین خارج می کند ، که به صورت محلول قلیایی بی رنگ به شیر اضافه می شود. فنول فتالین آزاد شده از فسفات ، در یک محیط قلیایی ، رنگ صورتی را نشان می دهد ، که نشان دهنده وجود آنزیم و در نتیجه پاستوریزاسیون کافی شیر نیست.
تکنیک تعریف. 2 میلی لیتر شیر تست و 1 میلی لیتر محلول کار فسفات سدیم فنل فتالاتین در لوله آزمایش اندازه گیری می شود و کاملاً مخلوط می شود. لوله آزمایش با محتویات بعد از 10 دقیقه در یک حمام آب با دمای 40-45 در حدود C. قرار می گیرد و پس از 1 ساعت ، رنگ محتویات لوله مشخص می شود. در صورت عدم وجود آنزیم فسفاتاز در شیر ، رنگ آن تغییر نمی کند ، شیر در دمای حداقل 63 درجه سانتیگراد پاستوریزه می شود. اگر محتویات لوله از صورتی روشن به صورتی روشن تبدیل شود ، آنگاه شیر خام ، پاستوریزه شده زیر 63 درجه سانتیگراد یا خام با پاستوریزه مخلوط می شود.
