انجام هدفمند كنترل بهداشتي و باكتريولوژيكي محصولات غذايي ، شستشو از اجسام زيست محيطي ، آب ، ممكن است بطور موثر نظارت كنوني بهداشتي و اپيدميولوژيك كنوني را انجام دهد ، ارزيابي عيني از انطباق با رژيم ارائه مي دهد. در روشن شدن انتقال عفونت کمک می کند. خطاها در نمونه گیری می تواند منجر به ارزیابی نادرست بهداشتی نمونه های مورد بررسی با حساس ترین و دقیق ترین روش های تحقیقاتی و در نتیجه ارزیابی نادرست از خود جسم شود.
بنابراین ، یکی از اصول اساسی تحقیقات میکروبیولوژیکی ، نمونه گیری صحیح ، رعایت دقیق قوانین قواعد نمونه گیری و نسبت کمی آنهاست.
GOST R 54004-2010 ”محصولات غذایی. روش های نمونه برداری برای آزمایش میکروبیولوژیکی "
GOST R 53430-2009 "شیر و فراورده های شیر. روشهای تحلیل میکروبیولوژیکی "
GOST R ISO 707 - 2010 ”شیر و فراورده های لبنی. راهنمای نمونه برداری
ویژگی های نمونه گیری مواد غذایی مطابق با GOST R 54004-2010:
1. قبل از نمونه گیری بر اساس یک بازرسی بصری ، واحدهای بسته بندی یا محصولات به 3 گروه تقسیم می شوند ، در حالی که نمونه گیری برای هر گروه به طور جداگانه انجام می شود:
از نظر ظاهری طبیعی (بدون علائم فساد میکروبی)
- مشکوک (با علائم انحرافاتی که ممکن است در اثر لکه های میکروبی ایجاد شود یا به دلیل واکنش شیمیایی یا بیوشیمیایی موجود در محصول باشد)
- محصولات خراب شده هنگام بازرسی که نقایص آشکار محصول (بمب گذاری ، قالب ، مخاط و غیره) را نشان می دهد. محصولاتی با ماندگاری طولانی برای تحقیق انتخاب نشده اند.
2. نمونه ها با استفاده از ابزارهای استریل در ظروف استریل گرفته می شوند که گلو آن در شعله سوزانده می شود (کوزه های استریل یا کیسه های استریل ، ظروف پلاستیکی استریل).
اگر نمونه گیری برنامه ریزی شده انجام شود و یک نمونه تشکیل شود ، پس از آنالیز میکروبیولوژیکی باید نمونه برداری برای مطالعات ارگانولپتیک و فیزیک شیمیایی انجام شود ، با رعایت قوانین آسپتیک که از آلودگی در زمان نمونه گیری جلوگیری می کند.
3. حجم (حجم) نمونه مطابق مستندات فنی برای این نوع محصول تعیین می شود. تعداد واحدهای بسته بندی با استانداردهای قابل اجرا ، OST ، TU و غیره تعیین می شود. در مورد محصولات مرتبط
4- اگر جرم نمونه برابر است با جرم محصول موجود در بسته بندی مصرف کننده ، پس از کل بسته بندی استفاده کنید. اگر جرم نمونه بیش از یک واحد بسته بندی باشد ، پس از آن چندین بسته مصرف می شود ، در غیر این صورت (بدون بسته بندی) ، نمونه با گرفتن نمونه های نقطه از نقاط مختلف گرفته می شود.
5- اگر جرم (حجم) محصول توسط STD ثابت نشده باشد ، حداقل 1 نمونه از محصولات موجود در ظروف مصرفی و حداکثر 1000 گرم (cm3) از محصولات موجود در ظروف حمل و نقل (توده های مایع ، مایع ، خمیر ، سست و قوام مخلوط) گرفته می شود. هنگام نمونه گیری از محصولات فله به وزن بیش از 1000 گرم ، از یکی از روش های زیر استفاده کنید:
6. نمونه های مواد غذایی منجمد در ظروف عایق بندی شده یا دارای مبرد قرار می گیرند. دمای چنین نمونه هایی هنگام حمل و نقل نباید از منهای 150 درجه سانتیگراد تجاوز کند. نمونه فرآورده های قابل تجزیه در دمای 50 درجه سانتیگراد در کیسه های خنک کننده با مبرد برای بیش از 6 ساعت منتقل می شود. در موارد دیگر ، NTD ها توسط هر نوع محصول هدایت می شوند.
7. نمونه برداری از شیر و لبنیات طبق: GOST 26809-86 ”شیر و لبنیات انجام می شود. قوانین پذیرش ، روش های نمونه گیری و تهیه نمونه ها برای تجزیه و تحلیل. " در صورت ارائه محصولات در بسته بندی مصرف کننده - 1 واحد بسته بندی مصرف کننده انتخاب شده است. هنگام تهیه نمونه ترکیبی ، به عنوان مثال ، پنیر: 3 نمونه از هر واحد بسته بندی حمل و نقل گرفته می شود: 1 از مرکز ، 2 نفر دیگر با فاصله 5 سانتی متر از دیوار جانبی. توده انتخاب شده به یک ظرف استریل منتقل می شود و یک نمونه ترکیبی با وزن 500 گرم تشکیل می شود و در هنگام تعیین مقدار بیفیدوباکتری ها در محصولات شیر \u200b\u200bتخمیر شده ، 3 واحد بسته بندی مصرف کننده با نمونه گیری تصادفی انتخاب می شوند. اگر نمونه ها در دمای بالاتر از 6 0 درجه سانتیگراد منتقل شدند ، میکروبیولوژیکی باید بیش از 4 ساعت پس از نمونه گیری شروع نشود ، و نمونه های بستنی نباید بیشتر از 2 0 C باشد.
8. نمونه گیری از محصولات ماهی - طبق GOST 31339-2006 "ماهی ، اشیاء غیر ماهی و محصولات آنها"
9. محصولات گوشت مطابق با GOST R 51447-99 "گوشت و محصولات گوشت"
10. گوشت مرغ ، محصولات غیرمستقیم و نیمه تمام طیور مطابق با GOST R 50396.0-92 "گوشت مرغ ، محصولات فرعی و نیمه تمام مرغ".
9. هنگام نمونه برداری از محصولات در مراکز پذیرایی عمومی ، باید با شماره 2657 MU "در مورد کنترل بهداشتی و باکتریولوژیک در مراکز پذیرایی عمومی و تجارت محصولات غذایی" راهنمایی شود.
اگر نمونه ای از ظرف در دیس برداشته شود ، سپس کل قسمت از صفحه به داخل شیشه منتقل می شود. اگر نمونه ای از انبوه محصول (در یک تابه ، از یک تکه بزرگ گوشت) در آشپزخانه گرفته شود ، نمونه ای با وزن حدود 200 گرم (نمونه های ظروف مایع - پس از مخلوط کردن کامل ؛ ظروف متراکم - از مکان های مختلف در عمق قطعه) گرفته می شود. نوشیدنی های معدنی ، غیر الکلی و آبجو در مقدار 1 بطری بسته بندی کارخانه یا 200 میلی لیتر نوشیدنی ساخته شده در شرکت انتخاب می شوند.
هنگام نمونه\u200cگیری از محصولی از قوام پیچیده ، کلیه مؤلفه ها باید با همان نسبت محصول اصلی در آن گنجانده شوند. در صورت لزوم ، هر مؤلفه جداگانه گرفته می شود.
محصولات فله قبل از گرفتن نمونه کاملاً مخلوط می شوند ، یا نمونه آن از نمونه های نقطه تشکیل شده است.
10- کلیه نمونه ها با برچسب هایی تهیه می شوند که علاوه بر تعداد نمونه ، نام محصول ، تاریخ و زمان نمونه گیری و همچنین تاریخ و زمان تولید نیز وجود داشته باشد و باید ماندگاری محصول مشخص شود. نمونه ها پلمپ یا پلمپ می شوند.
11. در فرایند نمونه گیری ، یک پروتکل نمونه گیری تهیه شده و ارجاع به مطالعه ذکر شده است که دلیل نمونه برداری (برنامه ریزی ، برنامه ریزی نشده ، مطالعات اپیدمیولوژیک و غیره) را نشان می دهد و هدف از آزمون انطباق را نشان می دهد:
الزامات بهداشتی - اپیدمیولوژیک و بهداشتی متحد برای کالاهای مصوب. 05/28/2010 برای شماره 299
TR TS 02 \\ 2011 "در مورد ایمنی مواد غذایی"
SanPiN 2.3.2.1078-01 "الزامات بهداشتی برای ایمنی و ارزش غذایی مواد غذایی"
آیین نامه فنی قانون فدرال در مورد شیر و لبنیات شماره 88-ФЗ مورخ 12 ژوئن 2008
قانون فدرال مقررات فنی برای محصولات چربی و روغن
قانون فدرال مقررات فنی در مورد محصولات آب میوه و سبزیجات شماره 178-ФЗ مورخ 27 اکتبر 2008
دستورالعمل روش تحقیق ، حسابداری و تحقیقات آزمایشگاهی در موسسات سرویس بهداشتی - اپیدمیولوژیک مسمومیت با مواد غذایی شماره 1135-73 گرم
الزامات بهداشتی و اپیدمیولوژیک و بهداشتی یکپارچه برای کالاهایی که تحت نظارت بهداشتی و اپیدمیولوژیک (کنترل) قرار دارند با هدف اجرای مفاد موافقت نامه اتحادیه گمرک در مورد اقدامات بهداشتی مورخ 11 دسامبر 2009 تهیه شده است.
مطابق با شماره 2657 MU مورخ 12/31/82 "در مورد كنترل بهداشتي و باكتريولوژيك در موسسات سرو غذا و تجارت مواد غذايي".
در عمل نظارت روتین بهداشتی از سرویسهای پذیرایی مهد کودکها ، مهد کودکها و نوجوانان و همچنین کمدهای طراوت ، روش شستشو به طور گسترده برای نظارت بر اثربخشی سرویسهای بهداشتی تجهیزات ، ظروف ، ظروف ، لباسهای بهداشتی و دست پرسنل استفاده می شود. روش گرگرفتگی امکان ارزیابی عینی بهداشتی مؤسسات مورد بررسی امکان پذیر است.
در هنگام شستشو ، به کنترل تجهیزات و وسایل مورد استفاده در طی فرآیند تکنولوژیکی تهیه محصولاتی که تحت تصفیه حرارتی بیشتر قرار نمی گیرند ، توجه ویژه ای می شود.
کنترل باکتریولوژیک با شستن سطوح ، تجهیزات ، دست و لباس بهداشتی پرسنل می تواند دو هدف را دنبال کند:
الف) اثربخشی ضد عفونی کردن را برقرار کنید ؛ برای این کار ، پرسنل خود را از تجهیزات ، تجهیزات ، دستها و لباسهای بهداشتی قبل از شروع کار شستشو دهید ، یا در صورت عدم امکان این کار ، در هنگام استراحت بعد از اینکه دستها و تجهیزات ضد عفونی شده اند ، یعنی. شستشوها از اشیاء تمیز ساخته می شوند.
ب) تعیین نقش تجهیزات و دست پرسنل در آلودگی باکتریایی یک محصول یا ظرف تمام شده در طی فرآیند تولید ، توجه ویژه به تولید محصولات و ظروف تمیز شده که بدون استفاده از آن قبل از عمل گرما داده شده یا خورده شده اند (بعضی از سبزیجات ، محصولات معده ، سالاد ، vinaigrettes ، و غیره). برای حل این مشکل ، به همراه مصرف سواب ، نمونه های غذایی مکرر گرفته می شود (سواب از دست ها و سطوح غیر فرآوری شده گرفته می شود).
شستشو از سطح با یک سواب پنبه استریل مرطوب نصب شده بر روی شیشه یا نگهدارنده فلزی که در یک لوله پنبه ای از لوله نصب شده است ، انجام می شود. لوله آزمایش حاوی یک ماده استریل است. بلافاصله قبل از شستشو ، تامپون با پایین آمدن تامپون در مایع مرطوب می شود. هنگام مصرف سواب ، توصیه های زیر باید در نظر گرفته شود:
هنگام گرفتن سواب از اشیاء کوچک ، کل سطح شسته می شود. گرگرفتگی:
هنگام گرفتن سواب تعداد نمونه را به ترتیب ، محل گرفتن گرگرفتگی ثبت می کنید. عمل گرفتن شستشو در 2 نسخه تهیه شده است.
زمان تحویل - بیش از 2 ساعت نیست. با افزایش زمان ، تحویل در ظروف حرارتی.
انتخاب ، حفظ ، ذخیره و حمل و نقل نمونه های آب انجام می شود:
مطابق با GOST R 53415-2009 "آب. نمونه برداری برای آنالیز میکروبیولوژیکی "؛
مطابق با GOST 31942-2012 "آب. نمونه برداری برای آنالیز میکروبیولوژیکی "؛
مطابق با GOST R 51592 -2000 ”آب. الزامات عمومی برای نمونه برداری ”، تمام آب گرفته می شود ، که برای آزمایش به آزمایشگاه میکروبیولوژیکی تحویل داده می شود.
مطابق با GOST R 51593-2000 "آب آشامیدنی. نمونه برداری "، فقط مربوط به شیر آب سیستم های منبع تغذیه متمرکز است.
مطابق با الزامات استانداردها و سایر اسناد هنجاری در مورد روش های تعیین؛
شاخص های خاص و در نظر گرفته شده برای انواع خاصی از آب.
به عنوان مثال ، نمونه گیری آب از سیستم های تأمین آب شرب متمرکز بر اساس سه سند نظارتی انجام می شود:
- GOST R 51593-2000 ”آب آشامیدنی. نمونه برداری "
- MUK 4.2.1018-01 "تجزیه و تحلیل بهداشتی و میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی."
شرایطی که از آنها نمونه های آب برای مطالعات میکروبیولوژیکی گرفته می شود باید نزدیک به آسپتیک باشد ، یعنی. سوزاندن شیر آب را فراموش نکنید ، آب را از این شیر آب به مدت 10 دقیقه تخلیه کنید و تنها پس از آن آب را درون یک ظرف استریل بکشید. ظرف را بلافاصله قبل از انتخاب با جدا کردن چوب پنبه به همراه کلاه استریل باز کنید. هنگام نمونه برداری ، چوب پنبه و لبه های ظرف نباید به چیزی لمس کند. در حال حاضر ، از کیسه های یکبار مصرف برای نمونه گیری آب با و بدون قرص سدیم تیوسولفات استفاده می شود. ظروف را بشویید. نمونه مستقیماً از شیر آب بدون شیلنگ های لاستیکی ، شبکه های توزیع آب و نازل های دیگر گرفته می شود. اگر از طریق شیر نمونه برداری ، جریان آب دائمی وجود داشته باشد ، انتخاب بدون شلیک اولیه ، بدون تغییر فشار آب و ساختار موجود (در صورت شیلنگ های سیلیکون یا لاستیک) انجام می شود.
نمونه های آب از منبع تأمین آب متمرکز و غیر متمرکز مطابق با آب GOST R 51592-2000 ”تهیه می شود. الزامات نمونه برداری عمومی. "
آب یک کاسه استخر مطابق اسناد زیر انتخاب می شود:
GOST R 51592-2000 "آب. الزامات عمومی برای نمونه برداری "،
- SanPiN 2.1.2.1188-03 "استخرهای شنا. الزامات بهداشتی برای طراحی ، بهره برداری و کیفیت آب. کنترل کیفیت. "
نمونه های آب حداقل برای تجزیه و تحلیل حداقل 2 نقطه گرفته می شوند: لایه سطح ضخامت 0.5 - 1.0 سانتی متر و در عمق 25 - 30 سانتی متر از سطح آینه آب است. کنترل کیفیت آب حمام استخر با توجه به شاخص های اصلی میکروبیولوژیکی باید 2 بار در ماه انجام شود.
تجزیه و تحلیل نمونه ها در آزمایشگاه باید در اسرع وقت از زمان نمونه برداری انجام شود. در صورت عدم خنک شدن ، آنالیز حداکثر 2 ساعت پس از نمونه برداری انجام می شود و هنگامی که در دمای 4-10 درجه سانتیگراد سرد شود ، ماندگاری نمونه به 6 ساعت افزایش می یابد. بنابراین لازم است نمونه ها در ظروف حرارتی به آزمایشگاه منتقل شوند (از یخ زدن خودداری کنید ، زیرا بیش از 99٪ باکتری ها در هنگام انجماد نمونه می میرند).
از آنجا که با توجه به عملکرد ضد عفونی کننده های باقیمانده (کلر در مدت چند ثانیه) ، میکروارگانیسم های موجود در نمونه می توانند در کمتر از 20 دقیقه به نصف کاهش پیدا کنند ، از آنها در ظرفی با تیوسولفات سدیم (به میزان 10 میلی گرم در هر 500 میلی لیتر آب) برای خنثی کردن آب کلرینه و برنج استفاده می شود.
حجم نمونه بسته به تعداد شاخص های تعیین شده و نوع تجزیه و تحلیل مطابق با سند هنجاری در روش تعیین شاخص ها تعیین می شود. به عنوان مثال ، حجم نمونه در تجزیه و تحلیل آب و شیر آب از چاه برای میکروارگانیسم های شاخص به میزان 350 میلی لیتر آب و برای میکروارگانیسم های شاخص و فلور بیماری زا - 1350 میلی لیتر ، حجم نمونه آب استخرهای شنا به ترتیب 500 میلی لیتر و 1500 میلی لیتر است.
SanPiN 2.1.4.1116-02 "آب قابل شرب. الزامات بهداشتی برای کیفیت آب بسته بندی شده در ظروف. کنترل کیفیت "، MU 2.1.4.1184-03" دستورالعملهای مربوط به اجرای و اعمال قوانین و معیارهای بهداشتی و اپیدمیولوژیکی SanPiN 2.1.4.1116-02 "آب آشامیدنی. الزامات بهداشتی برای کیفیت آب بسته بندی شده در ظروف. کنترل کیفیت
نوشیدن آب ، بسته بندی شده در ظروف ، به میزان 2.5 لیتر مصرف می شود ، زیرا فقط برای تعیین سودوموناس آئروژینوزا و کلیپ ها ، 1.0 لیتر آب مورد نیاز است.
نمونه برداری از خاک مطابق با GOST 17.4.3.01-83 "الزامات عمومی برای نمونه برداری از خاک" ، GOST 17.4.4.02-84 "روش های نمونه گیری و تهیه نمونه ها برای تجزیه و تحلیل شیمیایی ، باکتریولوژیکی ، ژلمیتولوژیکی" انجام شده است.
محل آزمایش بخشی از منطقه مورد مطالعه است که با شرایط مشابه (توپوگرافی ، یکنواخت بودن ساختار خاک و پوشش گیاهی ، ماهیت استفاده اقتصادی) مشخص می شود.
محل آزمایش باید در محلی مشخص شود که منطقه مورد مطالعه است. در زمینی به مساحت 100 متر مربع ، یک محوطه آزمایش با اندازه 25 متر قرار داده شده است.
نمونه نقطه - ماده ای که از یک مکان افق یا یک لایه از مشخصات خاک گرفته شده است ، نمونه ای برای یک افق یا لایه مشخص است.
نمونه های لکه ای با استفاده از روش پاکت در یک مکان آزمایش از یک یا چند لایه یا افق گرفته می شوند. آنها یک گودال 0.3m x 0.3m و عمق 0.2m را حفاری می کنند. سطح یکی از دیواره های گودال با یک چاقوی استریل تمیز می شود. سپس یک نمونه خاک از این دیوار بریده می شود که اندازه آن با نمونه مشخص شده مشخص می شود ، بنابراین در صورت لزوم گرفتن 200 گرم خاک ، اندازه نمونه 20 cm x 3 cm x 3 cm ، 500 گرم - 20 cm x 5 cm x 3 cm می باشد.
نمونه های لکه با یک چاقو ، چاقوی بتونه یا مته خاک گرفته می شوند.
نمونه مخلوط شده با مخلوط کردن نمونه های نقطهای گرفته شده در همان محل آزمایش ساخته می شود.
برای تجزیه و تحلیل باکتریولوژیک ، 10 نمونه ترکیبی از یک محل آزمایش تهیه می شود. هر نمونه ترکیبی از سه نمونه نقطهای با وزن 200 تا 250 گرم در هریک از آنها ، در لایه هایی از عمق 0 تا 5 سانتی متر ، از 5 تا 20 سانتی متر گرفته شده است.
نمونه های خاک در نظر گرفته شده برای آنالیز باکتریولوژیک ، برای جلوگیری از آلودگی ثانویه آنها ، باید مطابق با قوانین آسپتیک گرفته شوند: با سازهای استریل ، روی یک سطح استریل مخلوط کنید ، در یک ظرف استریل قرار دهید. زمان نمونه گیری تا شروع مطالعه آنها نباید بیش از 1 روز باشد.
هنگام کنترل وضعیت بهداشتی خاکهای سرزمینهای موسسات کودک و زمین های بازی ، نمونه گیری به طور جداگانه از ماسهبازی و از یک قلمرو مشترک از عمق 0 - 10 سانتی متر انجام می شود.
یک نمونه استخر که از نمونه 5 نقطه تشکیل شده است ، از هر جعبه ماسه ای گرفته می شود. در صورت لزوم ، گرفتن یک نمونه ترکیبی از کلیه ماسهبازی های هر گروه سنی ، متشکل از نمونه های 8-10 نقطه ای.
نمونه های خاک یا از قلمروهای بازی هر گروه گرفته می شوند (یک ترکیب حداقل از پنج نقطه) ، یا یک نمونه ترکیبی از کل 10 نقطه ، با محتمل ترین مکان های آلودگی خاک در نظر گرفته می شود.
هنگام نظارت بر خاک در منطقه از نقاط نقطه آلودگی (حوضچه آبریزها ، سطل زباله و غیره) ، مکانهای آزمایش اندازه گیری بیش از 5 5 5 متر در فواصل مختلف از منبع و در مکانی نسبتاً تمیز (کنترل) قرار می گیرند.
در بررسی آلودگی خاک توسط بزرگراه ها ، سایت های آزمایش با در نظر گرفتن توپوگرافی ، پوشش گیاهی ، آب و هوا و شرایط هیدرولوژیکی در خطوط کنار جاده قرار داده شده است.
نمونه های خاک از نوارهای باریک 200 - 500 متر به فاصله 0-10 ، 10-50 ، 50-100 متر از کنار جاده گرفته می شوند. یک نمونه مخلوط از نمونه های 20-25 نقطه ای گرفته شده از عمق 0-10 سانتی متر تشکیل شده است.
هنگام ارزیابی خاک خاک های کشاورزی ، نمونه های خاک 2 بار در سال (بهار ، پاییز) از عمق 0-25 سانتی متر گرفته می شوند. برای هر 0 تا 15 هکتار ، بسته به شرایط زمین و شرایط کاربری زمین ، حداقل 1 سایت به اندازه 100-200 متر مربع در نظر گرفته شده است.
برای تهیه نمونه متوسط \u200b\u200b0.5 کیلوگرم ، خاک تمام نمونه های یک بخش روی یک کاغذ استریل و ضخیم کاغذ ریخته می شود ، کاملاً با یک کفگیر استریل مخلوط می شود ، سنگ ها و سایر اجسام جامد دور ریخته می شوند. سپس خاک بر روی ورق با یک لایه نازک به شکل مربع توزیع می شود.
به صورت مورب ، خاک به 4 مثلث تقسیم می شود ، خاک از دو مثلث مخالف دور ریخته می شود و بقیه دوباره مخلوط می شوند ، دوباره در یک لایه نازک توزیع می شوند و به صورت مورب تقسیم می شوند تا تقریباً 0.5 کیلوگرم خاک باقی بماند.
سپس نمونه با جهت و عمل نمونه برداری به آزمایشگاه تحویل داده می شود.
نمونه گیری متوسط. هنگام تجزیه و تحلیل دسته ای از محصول ، یک نمونه متوسط \u200b\u200bتهیه می شود. برای محصولات مختلف غذایی ، هنجارهای نمونه های منتخب و قوانین انتخاب آنها تعیین می شود. با این وجود ، در همه موارد ، باید شرایطی را رعایت کرد که باعث عدم آلودگی محصول آزمایش شده با میکروارگانیسم های خارجی می شود.
در مطالعه محصولات مایع و نیمه مایع (شیر ، خامه ترش ، سس و غیره) آنها کاملاً مخلوط شده و سپس با یک قاشق غذاخوری استریلیزه 50 تا 100 سانتی متر 3 در یک ظرف استریل انتخاب می شوند. نمونه محصولات متراکم (گوشت ، سوسیس ، ماهی ، محصولات پخت و پز و غیره) از ضخامت محصول در مکان های مختلف گرفته می شود. پیش از این ، سطح سایت های آزمایش با یک چاقوی داغ احتیاط می شود و برش عمیق از طریق آن با یک پوست سر استریل انجام می شود. لبه های برش با فورسپس استریل به یکدیگر جدا می شوند و قطعات کوچک محصول با قیچی استریل بریده می شوند. نمونه هایی که به این ترتیب از مکانهای مختلف انتخاب می شوند ، زمینی هستند که در یک ظرف استریل جمع آوری شده و نمونه متوسط \u200b\u200bرا تشکیل می دهند.
در هنگام گرفتن نمونه متوسط \u200b\u200bاز محصولاتی مانند کره ، پنیر لپه ، پنیر ، از یک کاغذ استریل استفاده می شود که از یک لبه به داخل محصول وارد می شود و به صورت عمودی و عمودی به طرف مقابل می آید. سپس با یک اسکالپل استریل ، قطعاتی از چندین مکان از نمونه انتخاب شده در طول طول کاوشگر گرفته شده ، خرد می شوند و در یک ظرف استریل قرار می گیرند.
آماده سازی نمونه برای تجزیه و تحلیل. در مطالعه محصولات متراکم از یک نمونه متوسط \u200b\u200b، یک نمونه از 1-10 گرم را بگیرید ، آن را به ملات استریل منتقل کنید و کاملا خرد کنید. اگر محصول بسیار متراکم است ، آنگاه با ماسه کوارتز گرم شده از قبل گرم می شود. محصول زمینی با 99 یا 90 سانتی متر مکعب نمک فیزیولوژیکی استریل (0.85٪ محلول کلرید سدیم) در یک فلاسک وارد می شود. محتویات فلاسک را به مدت 5 دقیقه به آرامی تکان دهید. اولین رقیق محصول در فلاسک بدست می آید (1:10) که از آن رقیق های بعدی تهیه می شود.
بخشی از کره در یک حمام آب با دمای بیش از 45 درجه سانتیگراد ذوب نمی شود سپس یک سانتی متر 3 از محصول با یک پیپ استریل به 9 سانتی متر 3 از نمک فیزیولوژیکی آغشته می شود و رقیق 1:10 می شود.
برای مطالعه محصولات مایع و نیمه مایع از نمونه متوسط \u200b\u200bآنها ، پس از مخلوط کردن کامل ، یک پیپت استریل 1 سانتی متر 3 گرفته شده و با 9 سانتی متر 3 از نمک فیزیولوژیکی استریل داخل لوله آزمایش قرار می گیرد.
آماده سازی رقت ها. محصولات غذایی ممکن است حاوی تعداد قابل توجهی میکروارگانیسم باشند ، بنابراین برای به دست آوردن کلنیهای جدا شده ، تهیه رقیق ده برابر محصول ضروری است. برای تهیه رقیق سازی ، آب شیر آب استریل یا نمکی فیزیولوژیکی در 9 سانتی متر 3 در لوله های تست استریل خشک با درپوش ها ریخته می شود.
اولین رقیق حاصل از محصول کاملاً با یک پیپت استریل جدید مخلوط می شود ، در آن جذب می شود و تعلیق بدست آمده از آن را آزاد می کند. این روش 3-5 بار انجام می شود ، سپس 1 سانتی متر 3 تعلیق با همان پیپت گرفته می شود و با 9 سانتی متر 3 نمک استریل به لوله آزمایش دوم منتقل می شود. رقت دوم (1: 100) بدست می آید. پیپت نباید در مایع غوطه ور شود تا از ریختن میکروارگانیسم ها از سطح بیرونی آن جلوگیری شود. محتویات رقت دوم کاملاً با یک پیپت استریل جدید مخلوط می شود ، 1 سانتی متر 3 جمع آوری شده و با 9 سانتی متر 3 آب استریل به لوله آزمایش بعدی منتقل می شود و رقیق سوم را بدست می آورد (1: 1000). رقیق های بعدی به همان روش تا زمانی که لازم باشد تهیه می شوند. برای تهیه هر رقت باید از پیپت استریل جداگانه استفاده شود.
کاشت در ظرف های پتری. برای تعیین KMAFAnM از روش بذر عمیق در محیط مواد مغذی جامد استفاده کنید. الگوی کاشت در شکل 3 نشان داده شده است.
با استفاده از پیپت استریل ، 1 سانتی متر 3 از رقیق مناسب سیستم تعلیق از لوله گرفته شده و به 2-3 ظروف استریل خالی پتری منتقل می شود. 15 دقیقه پس از ایجاد رقیق شدن سیستم تعلیق ، صفحات را با یک ماده مغذی ریخته می شود. برای این کار چوب پنبه را از لوله آزمایش یا فلاسک با مواد مذاب مذاب سرد کرده و تا دمای 45-50 درجه سانتیگراد سرد شده بالای شعله چراغ روح برداشته و لبه ها را بسوزانید. سپس درب فنجان را باز کنید تا فقط گردن فلاسک وارد شود و با دقت 10-15 سانتی متر 3 PS بریزید ، ضخامت لایه باید حدود 5 میلی متر باشد. درب فنجان بسته شده و بلافاصله با حرکات چرخشی سبک فنجان ، ماده مغذی مواد غذایی با دانه مخلوط می شود و پس از آن آنها برای مدت زمان 10 تا 15 دقیقه در حالت افقی می گذارند تا محکم شود. فنجان های کاشته شده به صورت وارونه و در یک ترموستات با دمای 1 37 37 درجه سانتیگراد به مدت 24-48 ساعت قرار می گیرند.
شمارش مستعمرات رشد یافته. پس از جوجه کشی ، صفحاتی انتخاب می شوند که 30 تا 300 کلنی از لحاظ بصری رشد کرده و شمرده می شوند و یا از دستگاه مخصوص شمارش کلونی استفاده می کنند. هنگام شمارش کلنی ها ، فنجان ها در نور منتقل شده مشاهده می شوند و کلنی های شمارش شده با جوهر یا جوهر مشخص می شوند. تعداد میکروارگانیسم ها در 1 سانتی متر 3 (یا 1 گرم) از محصول (KMAFAnM) به عنوان محصول تعداد کلنی های رشد یافته (N) توسط شاخص رقت (n) تعریف می شود:
KMAFAnM \u003d N 10 n CFU / cm 3
میکروارگانیسم های بی هوازی با روش فنجان مشخص نمی شوند ، زیرا برای کشت آنها ایجاد شرایط بی هوازی لازم است. بی هوازی در بی هوازی ها کشت می شوند.
اندازه فونت
روشهای کنترل خاک میکروبیولوژیکی توصیه های روششناسی (تصویب شده توسط پزشک ارشد بهداشتی دولت فدراسیون روسیه ... در واقع در سال 2018
کنترل آلودگی خاک شهرکها با در نظر گرفتن مناطق عملکردی شهر انجام می شود. مکان های نمونه برداری مقدماتی بر روی نقشه مشخص شده اند که ساختار منظر شهری را نشان می دهد. نمونه برداری مطابق با GOST 17.4.4.01-83 "الزامات عمومی برای نمونه برداری از خاک" انجام می شود. GOST 17.4.4.02-84 "روش های نمونه گیری و آماده سازی نمونه برای تجزیه و تحلیل شیمیایی ، باکتریولوژیکی ، هلمینولوژیکی." در قلمرو کنترل شده ، توضیحی ارائه شده است که نشان می دهد آدرس ، نقطه نمونه برداری ، تسکین عمومی ریزگردی ، محل استقرار نمونه برداری و منابع آلودگی ، پوشش گیاهی ، الگوهای کاربری اراضی ، سطح آب زیرزمینی ، نوع خاک و سایر داده های لازم برای ارزیابی صحیح و تفسیر نتایج آنالیز نمونه ها
نمونه برداری برای تجزیه و تحلیل باکتریولوژیکی حداقل 1 بار در سال در مکانهایی انجام می شود که افراد ، حیوانات و مکان های آلودگی با زباله های آلی امکان پذیر باشد. هنگام مطالعه پویایی خود تمیز کردن خاک ، انتخاب در طول ماه اول هفتگی و سپس ماهانه در طول فصل رشد تا زمان تکمیل مرحله فعال خود تمیز کردن انجام می شود.
محل آزمایش بخشی از منطقه مورد مطالعه است که با شرایط مشابه (توپوگرافی ، یکنواخت بودن ساختار خاک و پوشش گیاهی ، ماهیت استفاده اقتصادی) مشخص می شود.
محل آزمایش باید در محلی مشخص شود که منطقه مورد مطالعه است. در زمینی به مساحت 100 متر مربع. متر ، یک محل آزمایش به طول 25 متر در نظر گرفته شده است ، اگر امداد ناهمگن باشد ، مکانها مطابق با عناصر امدادی انتخاب می شوند.
نمونه نقطه - ماده ای که از یک مکان افق یا یک لایه از مشخصات خاک گرفته شده است ، نمونه ای برای یک افق یا لایه مشخص است.
نمونه های لکه ای با استفاده از روش پاکت در یک مکان آزمایش از یک یا چند لایه یا افق گرفته می شوند. گودال 0.3 mx 0.3 m و عمق 0.2 متر حفر شده است سطح یكی از دیواره های گودال با چاقوی استریل تمیز می شود. سپس یک نمونه خاک از این دیوار برش داده می شود که اندازه آن با نمونه مشخص شده مشخص می شود ، بنابراین در صورت نیاز به برداشتن 200 گرم خاک ، اندازه نمونه 20 cm x 3 cm x 3 cm ، 500 g - 20 cm x 5 cm x 3 cm است.
نمونه های لکه با یک چاقو ، چاقوی بتونه یا مته خاک گرفته می شوند.
نمونه مخلوط شده با مخلوط کردن نمونه های نقطهای گرفته شده در همان محل آزمایش ساخته می شود.
برای تجزیه و تحلیل باکتریولوژیک ، 10 نمونه ترکیبی از یک محل آزمایش تهیه می شود. هر نمونه ترکیبی از سه نمونه نمونه با وزن 200 تا 250 گرم در هر نمونه ، در لایه هایی از عمق 0 تا 5 سانتی متر ، از 5 سانتی متر تا 20 سانتی متر گرفته شده است.
نمونه های خاک که برای آنالیز باکتریولوژیک در نظر گرفته شده است ، برای جلوگیری از آلودگی ثانویه آنها ، باید مطابق با قوانین آسپتیک باشد: با ابزار استریل ، مخلوط شده بر روی یک سطح استریل ، قرار داده شده در یک ظرف استریل. زمان نمونه گیری تا شروع مطالعه آنها نباید بیش از 1 روز باشد.
هنگام مطالعه تأثیر سموم دفع آفات و سایر مواد شیمیایی بر روی میکرو فلورا و فرآیندهای خود تمیز کردن در لایه های عمیق تر خاک ، از گودال هایی با عمق 1 متر برای نمونه برداری از خاک استفاده می شود.مشاورات از هر 10 سانتی متر از دیواره گودال گرفته می شوند.
برای نظارت بر وضعیت بهداشتی خاکهای پیش دبستانی ، مدرسه و مؤسسات پزشکی ، زمین های بازی و مناطق تفریحی ، نمونه برداری حداقل 2 بار در سال - در بهار و پاییز انجام می شود. اندازه محل آزمایش نباید بیشتر از 5 5 5 متر باشد.
هنگام نظارت بر وضعیت بهداشتی خاک در قلمرو موسسات کودکان و زمین های بازی ، نمونه برداری به طور جداگانه از جعبه های ماسه ای و از یک قلمرو مشترک از عمق 0 - 10 سانتی متر انجام می شود.
یک نمونه استخر که از نمونه 5 نقطه تشکیل شده است ، از هر جعبه ماسه ای گرفته می شود. در صورت لزوم ، می توان یک نمونه ترکیبی را از کلیه ماسهبازی های هر گروه سنی ، متشکل از نمونه های 8 - 10 امتیاز گرفت.
نمونه های خاک یا از قلمروهای بازی هر گروه گرفته می شوند (یک ترکیب حداقل از پنج نقطه) ، یا یک نمونه ترکیبی از کل 10 نقطه ، با محتمل ترین مکان های آلودگی خاک در نظر گرفته می شود.
هنگام نظارت بر خاک در محدوده منابع نقطه آلودگی (حوضچه آبریزها ، سطل زباله و غیره) ، مکان های آزمایش اندازه گیری بیش از 5 x 5 متر در فواصل مختلف از منبع و در مکانی نسبتاً تمیز (کنترل) قرار می گیرند.
در بررسی آلودگی خاک توسط بزرگراه ها ، سایت های آزمایش با در نظر گرفتن توپوگرافی ، پوشش گیاهی ، آب و هوا و شرایط هیدرولوژیکی در خطوط کنار جاده قرار داده شده است.
نمونه های خاک از نوارهای باریک 200 - 500 متر به فاصله 0 - 10 ، 10 - 50 ، 50 - 100 متر از کنار جاده گرفته می شوند. یک نمونه مخلوط از نمونه های 20 - 25 نقطه ای از عمق 0-10 سانتی متر تهیه شده است.
هنگام ارزیابی خاکهای مناطق کشاورزی ، نمونه های خاک 2 بار در سال (بهار ، پاییز) از عمق 0 - 25 سانتی متر گرفته می شود و برای هر 0 - 15 هکتار حداقل 1 سایت با ابعاد 100 - 200 متر مربع در نظر گرفته شده است. متر بسته به زمین و شرایط استفاده از زمین.
در خاک شهرهای بزرگ با منابع آلودگی بی شماری ، نقشه برداری ژئوشیمیایی در یک شبکه آزمایش انجام می شود. برای شناسایی کانون های آلودگی ، تراکم نمونه برداری از 1 - 5 نمونه در هر مربع. کیلومتر با فاصله بین نقاط نمونه برداری از 400 - 1000 متر برای شناسایی بیشتر قلمرو با حداکثر میزان آلودگی ، شبکه آزمایش به 25 - 30 نمونه در هر مربع ضخیم می شود. کیلومتر با فاصله بین نقاط نمونه برداری در حدود 200 متر نمونه برداری از عمق 0 - 5 سانتی متر گرفته شده است.
نمونه های انتخاب شده باید در ژورنال شماره گذاری و ثبت شوند و داده های زیر را نشان می دهد: شماره سریال و محل نمونه گیری ، توپوگرافی ، نوع خاک ، هدف مورد نظر از قلمرو ، نوع آلودگی ، تاریخ نمونه برداری.
نمونه ها باید دارای لیبل باشند که محل و تاریخ نمونه برداری ، تعداد بخش خاک ، اختلاف خاک ، افق و عمق نمونه برداری ، نام محقق را نشان دهد.
7. محدودیت اعتبار توسط فرمان استاندارد ایالتی اتحاد جماهیر شوروی از 01.23.91 N 38 حذف می شود.
8. ویرایش (آوریل 2010) با اصلاح شماره 1 ، مصوب سپتامبر 1989 (IMS 12-89)
این استاندارد بین المللی در مورد محصولات غذایی و عطر و طعم اعمال می شود و آماده سازی نمونه ها برای تجزیه و تحلیل میکروبیولوژیکی است.
اصطلاحات استفاده شده در استاندارد و توضیحات آنها در پیوست 1 آورده شده است.
1. ظاهرا ، REAGENTS و مواد
1.1. هنگام تهیه نمونه های آنالیز ، از تجهیزات ، معرفها و مواد زیر استفاده می شود:
حمام آب؛
هموژنایزر ، میکسر آزمایشگاهی یا ملات پرسلن مطابق با GOST 9147؛
دستگاه فیلتراسیون غشایی؛
مشعل گاز یا الکل مطابق با GOST 25336؛
قیف های فلزی؛
پانچ؛
کلید برای باز کردن بطری ها؛
قوطی بازکن؛
قیچی ، پوست سر ، موچین مطابق با GOST 21241 ، اسپاتول ، قاشق؛
استنسیل (قالب)؛
لوله های آزمایش مطابق با GOST 25336؛
فلاسکها مطابق با GOST 25336؛
پیپت های NTD؛
شاخه های لاستیکی؛
توپ های شیشه ای؛
الکل اتیل اصلاح شده مطابق با GOST 5962 * 70٪؛
________________
* GOST R 51652-2000 در قلمرو فدراسیون روسیه معتبر است.
کیسه های پلاستیکی؛
مواد شوینده؛
کلرید سدیم مطابق با GOST 4233؛
پپتون برای اهداف باکتریولوژیک مطابق با GOST 13805.
ابزار و سطح دستگاههای در تماس مستقیم با محصول باید با استفاده از یکی از روشهای مشخص شده در GOST 26668 استریل شوند.
1.2 تهیه محلول پپتون-نمکی
محلول پپتون نمکی به شرح زیر تهیه شده است: 8.5 گرم کلرید سدیم و 1.0 گرم پپتون در 1 dm از آب مقطر با گرم کردن آرام حل می شوند. محلول حاصل ، در صورت لزوم ، از طریق فیلتر کاغذی تنظیم می شود ، با pH 7.0 ± 0.1 تنظیم می شود ، داخل فلاسک ها ، لوله ها یا ظروف دیگر ریخته می شود ، در دمای (1 12 121) درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه ریخته می شود.
محلول در دمای تاریک و در دمای (2 4 4) درجه سانتیگراد به مدت بیش از 30 روز در شرایطی به استثنای تبخیر رطوبت ذخیره می شود.
دمای محلول پپتون نمکی باید مطابق با دمای محصول مورد بررسی باشد.
1.3 آماده سازی آب پپتون
آب پپتون به طور مشابه با محلول پپتون نمکی و بدون افزودن کلرید سدیم تهیه می شود.
2.1. بسته بندی نمونه را بررسی کرده و مکاتبات کتیبه را روی چاپ سنگ چاپی یا برچسب مشخص شده در سند همراه تعیین کنید.
2.2. بسته بندی نمونه از آلاینده ها تمیز می شود. اگر تجزیه و تحلیل نمونه های مهر و موم شده مهر و موم شده از محصول را دریافت کرد ، سپس محکم بودن ظرف را بررسی کنید. سفتی مواد غذایی کنسرو شده مطابق با GOST 8756.18 ، سفتی ظروف پلیمری با محصول و همچنین مواد غذایی کنسرو شده ، بسته شده با کلاه با یک غشای الاستیک (دکمه) - بصری تعیین می شود. سطح غشای الاستیک باید به سمت داخل مقعر باشد. ظروف شیشه ای ، فلزی یا پلیمری آب بندی شده با محصول با آب و مواد شوینده شسته می شوند و سپس با آب تمیز شسته می شوند و خشک می شوند. بسته بندی بی پروا با محصول با سواب مرطوب شده با الکل اتیل پاک می شود.
مواد غذایی کنسرو شده بلافاصله قبل از ترموستات آنالیز میکروبیولوژیکی.
ترموستات ها در معرض مواد غذایی کنسرو هستند:
از نظر ظاهری مهر و موم شده فاقد نقص ، به منظور تعیین میزان استریل صنعتی کنسرو و پایداری میکروبیولوژیکی مواد غذایی کنسرو شده.
دارای انتهای ارتعاش و کراکرها در یک ظرف بسته شده هرمتی ، طراحی شده برای شناسایی دلایل این نقص ها.
مواد غذایی کنسرو شده برای ردیابی سموم بوتولینوم موجود در آنها ، بمباران شده ، با علائم آسیب و نشت میکروبیولوژیکی ، در معرض کنترل دما نیستند.
برای تجلی فعالیت حیاتی میکروارگانیسم های هوازی مزوفیلی هوازی ، جیبی و بی هوازی و بی هوازی ، غذاهای کنسرو شده در ظروف 30-37 درجه سانتیگراد در ظروف با ظرفیت حداکثر 1 dm شامل حداقل به مدت 5 روز و در ظروف با ظرفیت بیش از 1 dm - حداقل برای 7 روز حرارت داده می شوند.
برای تجلی فعالیت حیاتی میکروارگانیسم های هوازی ، هوازی غیر هوازی و بی هوازی ترموفیلیک ، مواد غذایی کنسرو شده در ظروف با هر ظرفیتی حداقل 3 روز در دما 55-62 درجه سانتیگراد گرم می شوند. در حین کنترل دما ، کالاهای کنسرو روزانه بررسی می شوند. کالاهای کنسرو شده با نقص ظاهری ظروف بلافاصله پس از تشخیص آنها از ترموستات خارج شده و به مدت 24 ساعت در دمای اتاق نگهداری می شوند و پس از آن به وضعیت ظروف و در صورت امکان ظاهر محصول اشاره می شود. مواد غذایی کنسرو شده در ظرفی که بعد از خنک شدن در دمای اتاق ظاهر طبیعی به خود می گیرند ، عاری از نقص محسوب می شوند و به ترموستات ادامه می دهند.
پس از درجه حرارت مواد غذایی کنسرو شده و خنک شدن به مدت 24 ساعت تا دمای اتاق ، وضعیت ظرف و در صورت امکان ظاهر محصول ذکر می شود.
نقص مواد غذایی کنسرو در پیوست 2 آورده شده است.
2.3 تجزیه و تحلیل میکروبیولوژیکی نمونه های محصول که از نظر ظاهری طبیعی هستند ، در یک جعبه تحت شرایط آسپتیک انجام می شود. بسته بندی یک نمونه از محصول مشکوک یا خراب در یک اتاق جداگانه باز می شود.
آماده سازی بوکس در پیوست 3 آورده شده است.
2.2 ، 2.3. (نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 1).
2.4 نمونه هایی با محصول منجمد قبل از تهیه نمونه در دمای (2 4 4) درجه سانتیگراد ذوب می شوند. نمونه بلافاصله پس از ذوب گرفته می شود ، اما حداکثر 18 ساعت پس از شروع ذوب شدن.
مجاز به ذوب یک نمونه محصول در دمای 18-20 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت است.
نمونه محصول محکم یکنواخت ممکن است در دمای 35 درجه سانتیگراد در یک ترموستات ذوب شود ، مشروط بر اینکه ذوب کامل در بیش از 15 دقیقه حاصل نشود.
2.5. باز کردن بسته با نمونه ای از محصول
2.5.1. بلافاصله قبل از باز کردن بسته با نمونه ای از محصول موجود در بسته بندی مصرف کننده ، فله ای یا داشتن یک فاز مایع ، 10 بار چرخش ظروف از پایین به درب یا در یک حرکت دایره مخلوط کنید.
2.5.2 بسته ای با نمونه محصول (بجز کالاهای کنسرو شده) با سواب خیس شده در اتانول 70٪ ، پاک می شود ، الکل با تبخیر آزاد سوزانده می شود یا خارج می شود. سپس بسته بندی باز می شود ، گردن از قوطی های فلزی یا شیشه ای شلیک می شود و جرم (حجم) محصول به مقدار لازم برای تهیه یک یا چند نمونه گرفته می شود.
2.5.3. بسته بندی نمونه (کیسه های فویل ، مواد پلیمری یا کیسه های کاغذی) در مکانی باز می شود که قبلاً با سواب خیس شده در الکل درمان می شد. باز کردن بسته با نمونه ای از محصول به گونه ای انجام می شود که احتمال آلودگی محصول ، اشیاء اطراف و محیط زیست از این امر خارج شود.
2.5.4 سطح مواد غذایی کنسرو شده در ظاهر طبیعی قبل از باز شدن با یکی از روش های زیر با اتانول درمان می شود:
در شیشه های شیشه ای ، درب درمان می شود ؛ در قوطی های فلزی ، انتهای آن برعكس آن مشخص شده است.
سطح درب با یک سواب الکل پاک می شود ، تامپون روی سطح باقی مانده و قبل از باز کردن مواد غذایی کنسرو شده مشتعل می شود.
درپوش لاستیکی و درپوش تاج ، بسته های پلاستیکی و پلاستیکی نیز درمان می شوند ، اما تامپون روشن نمی شود.
پوشش فلزی (انتهای) بسته به هدف تجزیه و تحلیل ، با پانچ 1-4 بار در مجاورت فوری یک تامپون سوزاننده باز و یا سوراخ می شود. اندازه سوراخ (قطر یا طول) باید 1-3 سانتی متر باشد.
نمونه های منتخب از محصول بلافاصله در محیط مواد مغذی کاشته می شوند یا برای تهیه رقت به محلول پپتون نمکی منتقل می شوند.
قبل از باز کردن بطری ها یا لوله ها با درپوش های پیچ ، درپوش یا بوش درمان شده از آن جدا نشده است. لبه های بطری یا غشای لوله در شعله مشعل سوخته می شوند. غشاها با یک اسکالپل استریل سوراخ شده اند.
قبل از باز کردن بطری ، بسته شده با یک تاج یا روکش فویل ، دیافراگم در شعله مشعل سوزانده می شود ، دریچه با یک کلید استریل برداشته می شود ، لبه های بطری دوباره در شعله مشعل سوخته می شوند.
هنگام باز کردن بطری ها با مهر و موم لاستیکی ، مهر و موم شده با اتانول بدون شلیک قبلی برداشته می شود و لبه های بطری با شعله مشعل شلیک می شوند.
2.5.5 ظاهرا مواد غذایی کنسرو معیوب در یک سینی فلزی قرار می گیرند. بلافاصله قبل از انتخاب نمونه محصول ، سطح درب (انتهای) به روشی که در بند 2.5.2 تعیین شده است درمان می شود ، اما اتانول مشتعل نمی شود. درب درمان شده (یا انتهای) با قیف فلزی استریل معکوس پوشانده شده است به گونه ای که قیف کاملاً سطح آن را بپوشاند. با دقت کلاه (انتهای) را از طریق سوراخ باریک قیف با پانچ استریل سوراخ کرده و سوراخ سوزن را تشکیل دهید.
به جای قیف فلزی ، کیسه پلاستیکی مجاز است. پس از پردازش درب (انتهای) ، مواد غذایی کنسرو شده در یک کیسه پلاستیکی که از قبل با الکل اتیل مالیده شده است قرار داده می شود تا ته بسته بسته سطح در معرض آن شود. بسته پایین محکم گره خورده است. به آرامی با فشار سبک پانچ ، سوراخ را به طور هم زمان در درب قوطی قلع و در یک کیسه پلاستیکی محکم به آن فشار دهید.
پس از آنکه گاز و محصول دیگر با محصول خارج نشده ، قیف و کیسه برداشته می شود ، دوباره درب آن با سواب استریل پاک می شود ، سوراخ با پانچ باز می شود و نمونه ای از محصول بلافاصله از قوطی برای کاشت یا آماده سازی رقیق کننده های آن گرفته می شود.
2.6. انتخاب نمونه ها و تهیه رقت اولیه
2.6.1. از هر نمونه محصول بسته به شاخص های تعیین شده ، یک یا چند وزن برای تهیه رقت و / یا بذر در محیط کشت تهیه می شود.
2.6.2. جرم (حجم) نمونه در نظر گرفته شده برای تلقیح در محیط کشت و / یا برای تهیه رقیق کننده های آن باید در مستندات هنجاری و فنی برای نوع خاصی از محصولات یا روش های تجزیه و تحلیل مشخص شود.
2.6.3. نمونه کاشت با وزن یا روش حجمی بلافاصله پس از باز کردن نمونه محصول گرفته می شود. کالبد شکافی در شرایطی انجام می شود که آلودگی محصول با میکروارگانیسم ها را از هم جدا می کند ، در مجاورت آن شعله سوزان با ابزارهای استریل.
2.6.4. نمونه ای از محصول گرفته شده است به گونه ای که تمام اجزای آن در آن با همان نسبت موجود در نمونه تحلیل شده ارائه می شوند.
2.6.5. برای تهیه رقیق کردن نمونه ای از محصول ، از محلول پپتون نمکی استفاده می شود.
رقیق سازی اولیه محصولات با کسری انبوه NaCl بیش از 5٪ مجاز است با استفاده از آب پپتون ، رقیق سازی اولیه گوشت ، ماهی و لبنیات با استفاده از نمکی فیزیولوژیکی تهیه شود.
جرم (حجم) نمونه ای از محصول مورد نظر برای تهیه رقت اولیه یا هموژنات حداقل باید (1 (10)) گرم در سانتی متر باشد.
نسبت بین جرم (حجم) یک نمونه از محصول با میزان محلول پپتون-نمکی برای رقیق شدن اولیه و متعاقب آن است:
1: 9 - برای رقت 10 برابر (برای محصولاتی که حاوی مقدار زیادی چربی بدون مواد فعال کننده 1:10) باشد.
1: 5 - برای رقت 6 برابر؛
1: 3 - برای رقت 4 برابر؛
1: 1 - برای رقت 2 برابر.
در صورت نیاز به رقیق کردن نمونه ای از محصولات حاوی مقدار زیادی چربی ، مجاز به استفاده از سورفاکتانت ها (بی کربنات سدیم و غیره) هستند که فعالیت ضد میکروبی ندارند.
برای تهیه رقیق نمونه ای از محصولات با فشار اسمزی بالا ، پپتون یا آب مقطر مجاز است.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 1).
2.6.6. رقت اولیه یک نمونه از محصول مطابق با شرایط آسپتیک به یکی از روشهای زیر تهیه شده است:
انحلال محصولات؛
رقیق محصولات دارای فاز مایع.
تعلیق پودرها ، محصولات خمیری و سطح قطعات محصول آلوده به میکروبها.
همگن سازی محصولات جامد.
2.6.7. نمونه هایی از محصولات مایع و چسبناک با پیپت استریل پنبه ای استریل با وارد کردن پیپت در عمق محصول گرفته می شوند.
بخشی از محصول باقی مانده بر روی سطح پیپت اجازه تخلیه تا نوک پیپت را دارد. قطره حاصل با لمس دیواره داخلی ظروف یا بسته بندی مصرف کننده در بالای سطح محصول برداشته می شود.
محصولات چسبناک با یک سواب استریل از سطح پیپت جدا می شوند.
بخشی از محصول برای تهیه رقت اولیه به ظرفی با محلول پپتون نمک منتقل می شود تا پیپت سطح محلول پپتون-نمکی را لمس نکند. یک پیپت استریل دیگر با پر کردن ده برابر و فشار دادن مخلوط ، محصول را با محلول پپتون نمکی مخلوط می کند.
هنگام کار با محصولات چسبناک ، برای مخلوط کردن سریعتر با محلول نمکی پپتون ، بهتر است چندین گلدان شیشه ای را درون ظرف ها مخلوط کنید.
2.6.8. محصول مایع ، که از دی اکسید کربن اشباع شده است (CO) ، به یک مخروط مخروط استریل بسته شده با یک درپوش پنبه یا داخل ظرف دیگر منتقل می شود و با هم زدن مکرر در یک حرکت دایره ای در یک حمام آب در دمای 30 تا 37 درجه سانتیگراد گرم می شود تا زمانی که متوقف شود. حباب های گاز ایستاده است.
نمونه ای از نمونه محصول طبق بند 2.6.7 تهیه و پردازش می شود.
2.6.9. نمونه ای از محصولات پودری یا فله ای با یک قاشق استریل یا اسپاتولا از نقاط مختلف محصول گرفته می شود (در صورت لزوم 2 سانتی متر از لایه بالای محصول قبل از برداشت نمونه با یک قاشق استریل برداشته می شود) ، سپس نمونه به یک ظرف استریل از پیش وزن شده با درب ، وزن داده می شود. محلول پپتون نمکی به مقدار لازم برای تهیه رقت اولیه به نمونه اضافه می شود. این مخلوط 25 بار در یک حرکت دایره ای با شعاع 30 سانتی متر هم زده می شود یا می لرزد تا یک استحکام یکنواخت از محصول بدست آید.
اگر محصول پودری در آب نامحلول باشد ، پس از مخلوط کردن آن با محلول پپتون-نمک ، سیستم تعلیق حاصل را به مدت 10 دقیقه می گذاریم و دوباره به مدت 1 دقیقه دوباره به شدت تکان می دهیم.
2.6.10. بخشی از نمونه های محصولات قابل باد در آب گرفته شده و رقت اولیه مطابق با الزامات اسناد اصولی و فنی برای نوع خاصی از محصول تهیه می شود.
2.6.11. نمونه ای از فرآورده های محلول در آب جامد پس از آسیاب ، خرد کردن یا خرد کردن در شرایط آسپتیک با یک قاشق یا قاشق نمونه برداری می شوند و طبق بند 2.6.9 پردازش می شوند.
بخشی از نمونه محصولات جامد غیر محلول در آب در مواردی که در مستندات هنجاری و فنی مشخص شده است ، یکدست می شود. در حین همگن سازی محصول ، تعداد کل انقلاب های هموژنایزر باید 15-20 هزار نفر باشد تعداد تعداد هموژنایزر نباید کمتر از 8000 و بیش از 45000 چرخش در دقیقه باشد.
اگر در حین همگن سازی محصول توده ناهمگن حاصل شود ، به مدت 15 دقیقه در حالت ایستاده باقی می ماند و از ماده رویی برای تلقیح و (یا) تهیه رقیق استفاده می شود.
مجاز به همگن کردن یک محصول استریل شده با آسیاب کردن آن است تا زمانی که یک سازگاری همگن در ملات استریل با رعایت شرایط آسپتیک حاصل شود.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 1).
2.6.12. نمونه ای از محصولات خمیر پس از مخلوط شدن کامل با قاشق یا میله شیشه ای گرفته می شود و طبق بند 2.6.9 پردازش می شود.
2.6.13. نمونه ای از چربی های مایع با یک پیپت گرم که با شعله ور شدن گرم می شود گرفته می شود. پس از پر کردن پیپت با محصول ، باقیمانده مواد باقیمانده از سطح پیپت جدا می شوند.
محصول پیپت با یک درپوش شیشه ای زیر زمینی داخل ظروف آورده می شود و با مقدار لازم از محلول نمکی پپتون ، با حرارت 40-40 درجه سانتیگراد رقیق می شود. در صورت شناسایی میکروارگانیسم های روانگردان ، دما نباید از 37 درجه سانتیگراد تجاوز کند. چربی باقیمانده چسبیده به پیپت با محلول پپتون نمکی شستشو می شود که چندین بار مکیده شده و از پیپت آزاد می شود.
2.6.14. نمونه ای از چربی های جامد پس از برش محصول با چاقو یا سیم به قسمت های مختلف گرفته می شود. در صورت لزوم ، لایه بالایی را بردارید.
نمونه ای از محصول از سطح برش ها از نقاط مختلف با پوست سر گرفته می شود و با یک درب به یک ظرف وزن دار منتقل می شود.
یک توده مشخص از نمونه به یک بشقاب گردن با درپوش شیشه ای زمین منتقل می شود. چربی باقیمانده چسبیده به دیواره های ظروف در همان ظرف ها با مقدار مشخصی از محلول پپتون نمکی گرم شده 40-45 درجه سانتیگراد شسته می شود که در مقدار لازم برای بدست آوردن رقت اولیه به ظروف اضافه می شود.
از نظر حجم می توان نمونه ای از چربی های جامد گرفت. چربی ها در یک ظرف گردنی در حمام آب با دمای بیش از 45 درجه سانتیگراد ذوب می شوند. در صورت شناسایی میکروارگانیسم های روانگردان ، دما نباید از 37 درجه سانتیگراد تجاوز کند.
پس از مخلوط کردن چربی های ذوب شده ، آن را با یک پیپت گرم به ظرفی پهن و با درب شیشه ای زمین که حاوی مقدار لازم محلول پپتون-شور برای تهیه رقت اولیه است منتقل می کنیم. محلول پپتون نمکی تا 40-45 درجه سانتیگراد گرم می شود. در شناسایی میکروارگانیسم های روانگردان تا 37 درجه سانتیگراد
2.6.15. نمونه هایی از محصولات شلاق یا قوام بی نظیری که حاوی مقادیر زیادی چربی هستند ، پس از هم زدن با میله شیشه ای ، با یک قاشق در یک ظرف توزین گرفته می شوند و محلول پپتون نمکی گرم شده در دمای 40 تا 40 درجه سانتیگراد به مقدار لازم برای تهیه رقت اولیه اضافه می شود.
2.6.16. تعیین آلودگی میکروبی سطح نمونه های محصول با آبکش کردن با سواب پنبه ای انجام می شود.
یک سواب پنبه استریل با محلول پپتون نمک مرطوب می شود و سطح قطعات مختلف محصول آنالیز شده در مکان های مختلف با مساحت 100 سانتی متر با آنها مالیده می شود.
مساحت مورد تجزیه و تحلیل با استفاده از قالب های استریل با سوراخ هایی در اندازه مناسب اندازه گیری می شود.
سواب در یک لوله آزمایش حاوی 10 سانتی متر محلول پپتون-شور قرار می گیرد. محتوای لوله با استفاده از پیپت کاملاً مخلوط می شود. سیستم تعلیق حاصل رقت اولیه در نظر گرفته شده است.
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 1).
2.7 تهیه رقیق ده برابر
2.7.1. اولین رقیق ده برابر نمونه منبع است ، رقت اولیه مطابق بند 2.6 تهیه شده است. رقیق های بعدی از آن حاصل می شود.
2.7.2. رقت دوم بعدی از یک سهم رقت اصلی و نه سهم محلول پپتون نمکی با مخلوط کردن در شرایط آزمایشگاهی تهیه می شود.
اگر از پیپت برای مخلوط کردن رقت اولیه استفاده شود ، سپس 1 سانتی متر از رقت اولیه در 9 سانتی متر محلول پپتون-شور با همان پیپت بدون پیپت کردن سطح محلول اضافه می شود. رقت با ده بار مکش با پیپت دیگر مخلوط می شود و محتویات لوله از آن دمیده می شود.
2.7.3. رقت های سوم و بعدی به روش مشابه تهیه می شوند.
2.7.4. فاصله بین تهیه وزن محصول ، رقیق سازی آنها و کاشت بذر در محیط کشت نباید بیش از 30 دقیقه باشد.
پیوست 1
مرجع
مدت | توضیح |
حیرت | بخشی از نمونه ای از حجم خاص ، حجم ، تهیه شده برای تهیه هموژنات ، رقت اولیه یا بذر مستقیم در محیط کشت |
رقیق منبع | بخشی از محصول رقیق شده با محلول به غلظت مورد نظر ، که می تواند دو (2) ، چهار (4) ، شش (6) و اغلب اغلب ده برابر (10) رقت باشد. |
ثبات میکروبیولوژیکی مواد غذایی کنسرو شده | تطابق شاخص های کیفیت مواد غذایی کنسرو با الزامات تعیین شده توسط مستندات نظارتی و فنی برای این نوع محصولات از نظر شاخص های میکروبیولوژیکی |
غذای کامل کنسرو | مواد غذایی کنسرو شده ، ثبات میکروبیولوژیکی آن بستگی به مدت زمان نگهداری در درجه حرارت ذکر شده برای این نوع محصول در اسناد نظارتی و فنی ندارد |
استریل صنعتی مواد غذایی کنسرو شده | عدم وجود کنسرو میکروارگانیسم ها که قادر به تولید در دمای ذخیره سازی هستند ، برای این نوع مواد غذایی کنسرو شده ، و میکروارگانیسم ها و سموم میکروبی برای سلامتی انسان خطرناک است |
ظاهر طبیعی مواد غذایی کنسرو شده (با ارزیابی کیفیت میکروبیولوژیکی) | مواد غذایی کنسرو شده بدون نقص در ظروف ، بسته ها و مواد غذایی کنسرو شده |
نقص مواد غذایی کنسرو | هر اختلاف فردی در ظاهر کالاهای کنسرو شده ، وضعیت ظروف یا بسته بودن یا کیفیت محصول کنسرو شده با الزامات مستندات اصولی و فنی |
مواد غذایی کنسرو شده در گلدان ها با انتهای لرزش | مواد غذایی کنسرو شده در یک ظرف ، که یکی از انتهای آن هنگام فشار دادن به انتهای مخالف خم می شود ، اما پس از قطع فشار به حالت اولیه خود بر می گردد ، همچنین مواد غذایی کنسرو شده در یک ظرف که به دلیل نقض دمای ذخیره سازی متورم است ، می شود اما در دمای اتاق ظاهر طبیعی به دست می آورد |
تخته | مواد غذایی کنسرو شده در یک ظرف با یک ته دائم متورم (درب) ، و یک موقعیت طبیعی را بدست می آورید (در حالی که انتهای مخالف متورم است). پس از افسردگی ، قسمت پایین (پوشش) به حالت متورم قبلی خود باز می گردد |
کنسرو بمب | مواد غذایی کنسرو شده در یک ظرف متورم ، قادر به ظاهر طبیعی نیست |
مواد غذایی کنسرو محکم | وضعیت ظروف و بسته شدن ، محافظت از مواد غذایی کنسرو شده از نفوذ میکروارگانیسم ها به آنها در هنگام عقیم سازی (پاستوریزه کردن) ، ذخیره سازی و حمل و نقل |
ترموستات کردن مواد غذایی کنسرو شده | مدت زمان مشخصی در دمای مناسب برای رشد میکروارگانیسم ها در محصول پخت می شود |
رول موضعی قسمت پایین قلاب درب در قوطی های فلزی یا صاف کردن موضعی قسمت پایین قفل لوله |
|
وارونگی درز محلی با بیرون زدگی شدید قلاب پوشش درز |
|
برش هواپیمای بالا یا پایین درز ، همراه با خارج کردن ظروف و بخشی از ورق از صفحه درز |
|
بخیه تقلبی | عدم قلاب |
درز نورد (پوست کنده) | آب بندی بیش از حد کف درز برای صاف کردن کف درز |
(نسخه اصلاح شده ، اصلاحیه شماره 1).
پیوست 2
مرجع
نقص یک محصول کنسرو در نظر گرفته شده است:
علائم رشد میکروارگانیسم هایی که با چشم غیر مسلح قابل مشاهده هستند: تخمیر ، قالب ، مخاط و غیره.
رسوب در پایین قوطی یا در مرز سطح محصول با ظرف ("حلقه")؛
کدورت فاز مایع.
انعقاد
ترشح کردن؛
عجیب و غریب ، عجیب و غریب برای محصول ، بو و طعم و مزه نیست.
تغییر رنگ
نقایص ظروف ظروف دارای محصولات بسته بندی در نظر گرفته شده است:
علائم نشتی که با چشم غیر مسلح قابل مشاهده است: سوراخ ها ، از طریق ترک ها ، دودکش ها یا اثری از محصول خارج شده از قوطی.
بمباران
کراکر؛
کوزه هایی با انتهای ارتعاش؛
درز آب بندی نادرست طراحی شده در قوطی ها (زبان ها ، میخ ها ، زیرپوش ، درز کاذب ، درز نورد).
زنگ زدگی ، پس از برداشتن آن پوسته ها باقی می مانند.
تغییر شکل مورد ، انتها یا درز طولی قوطی ها به شکل لبه های تیز و "پرندگان"؛
روکش های کف پوش بر روی شیشه های شیشه ای ، زیر پوشش راه راه پوشش در امتداد میدان نورد ، حلقه لاستیکی بیرون زده ("حلقه").
ترک یا تراشه در شیشه در درز ، تناسب ناقص پوشش ها نسبت به گردن قوطی؛
تغییر شکل (تورفتگی) دربهای شیشه های شیشه ای ، که باعث نقض درز می شود.
غشاء الاستیک محدب (دکمه) روی جلد.
پیوست 3
مرجع
مواد غذایی کنسرو شده در یک اتاق بوکس ویژه برای تجزیه و تحلیل میکروبیولوژیکی باز می شود. در جعبه نباید سطحی غیرقابل دسترسی برای ضد عفونی مرطوب وجود داشته باشد و حرکت هوا ایجاد شده توسط پیش نویس ها نیز از این امر مستثنی است. دیوارها ، کفها و سقفها باید با مواد پوشیده شده و یا با رنگ آغشته شوند ، در مقابل پردازش مرطوب با ضد عفونی کننده مقاوم باشند. برای عقیم سازی هوا ، جعبه به لامپ های ماوراء بنفش با سرعت 1.5-2.5 W در هر متر مجهز شده است.
فقط میکروبیولوژیست انجام تحلیل و در صورت لزوم یک دستیار باید در صندوق باشد.
باید یک میز و یک مدفوع در جعبه وجود داشته باشد. موارد اضافی به جز موارد مورد نیاز برای تجزیه و تحلیل مواد غذایی کنسرو وجود ندارد.
روی میز باید باشد:
چراغ روح یا مشعل گاز؛
قوطی با بستر مخصوص الکل؛
بسته شده با درب شیشه ای با تخته های پنبه استریل تنگ از پیش آماده شده به اندازه 3/3 سانتی متر یا حلقه های پنبه ای.
قوطی هایی با محلول ضد عفونی کننده (ارتفاع لایه 3 سانتی متر) برای قرار دادن پیپت ها یا لوله هایی که پس از تجزیه و تحلیل کار می شوند.
یک سینی فلزی یا مینای دندان کوچک که روی آن شیشه های آنالیز شده قرار داده شده است.
پیپت استریل یا لوله هایی که نمونه ای از آنها گرفته شده است.
در کشو جدول باید تجهیزات کمکی ذخیره شود: موچین و پانچ. پانچ باید به صورت یک نیزه با مقطع به صورت رومبوس با قطرهای 1x1.5 سانتی متر یا با مقطع به شکل مثلث ایزوله ساخته شود.
هنگام باز کردن تعداد زیادی قوطی ، از پانچ سوار شده بر روی سه پایه استفاده می شود. در این حالت کالبد شکافی با فشار دادن پانچ روی درب قوطی با اهرم انجام می شود.
قبل از باز کردن قوطی ها ، پانچ در شعله یک تامپون شعله ور می شود.
بوکس بلافاصله قبل از تجزیه و تحلیل (نه زودتر از 24 ساعت قبل از شروع) و پس از اتمام آن شسته و ضد عفونی می شود. ضد عفونی با پاک کردن تمام سطوح با کلر یا سایر داروهای ضد عفونی کننده طبق دستورالعمل های مربوط به هر دارو انجام می شود. 45 دقیقه قبل از شروع کار در بوکس ، لامپهای ضد باکتری به مدت 5 دقیقه (5 30 30) روشن می شوند.
در حال حاضر ، از جعبه های چند لایه (کابین های محافظ برای هوای مافوق صوت) برای انجام تجزیه و تحلیل های میکروبیولوژیکی استفاده می شود. جعبه های لمینار توسط کارخانه تجهیزات پزشکی Laminar Uzhgorod ساخته می شوند ، جعبه های BPV 1200 در مجارستان ، جعبه های TVG-S II 1.14.1 توسط Babcock - BSH (آلمان) ساخته می شوند.
ضمائم 2 ، 3. (علاوه بر این ، اصلاح شماره 1).
متن الکترونیکی سند
تهیه شده توسط Codex JSC و تأیید در برابر:
انتشار رسمی
محصولات غذایی ، مواد غذایی کنسرو شده.
روش های تجزیه و تحلیل میکروبیولوژیکی:
نشسته GOST ها - م.: Standartinform ، 2010
1. بسته بندی نمونه را بازرسی کنید و مکاتبات کتیبه را بر روی چاپ سنگی یا برچسب مشخص شده در سند همراه برقرار کنید.
2. بسته بندی نمونه از آلاینده ها تمیز می شود. اگر تجزیه و تحلیل نمونه های مهر و موم شده مهر و موم شده از محصول را دریافت کرد ، سپس محکم بودن ظرف را بررسی کنید. ظروف شیشه ای ، فلزی یا پلیمری آب بندی شده با محصول با آب و مواد شوینده شسته می شوند و سپس با آب تمیز شسته می شوند و خشک می شوند. بسته بندی بی پروا با محصول با سواب مرطوب شده با الکل اتیل پاک می شود.
3. تجزیه و تحلیل میکروبیولوژیکی نمونه های محصول که از نظر ظاهری طبیعی هستند ، در یک جعبه تحت شرایط آسپتیک انجام می شود. بسته بندی یک نمونه از محصول مشکوک یا خراب در یک اتاق جداگانه باز می شود.
4- نمونه هایی با محصول منجمد قبل از آماده سازی در دمای (2 4 4) درجه سانتیگراد ذوب می شوند. نمونه بلافاصله پس از ذوب گرفته می شود ، اما حداکثر 18 ساعت بعد. مجاز به ذوب شدن نمونه محصول در دمای 18-20 درجه سانتیگراد به مدت 1 ساعت می باشد نمونه هایی از محصول با قوام یکنواخت را می توان در یک ترموستات با دمای 35 درجه سانتیگراد ذوب کرد ، مشروط بر اینکه ذوب کامل در بیش از 15 دقیقه حاصل نشود.
5- افتتاح بسته با نمونه ای از محصول
5.1. بلافاصله قبل از باز کردن بسته با نمونه ای از محصول موجود در بسته بندی مصرف کننده ، محصولات فله یا حاوی مایع با 10 بار چرخاندن ظروف از پایین به درب یا در یک حرکت دایره مخلوط می شوند.
5.2 بسته بندی با نمونه ای از محصول (به جز کالاهای کنسرو شده) با سواب خیس شده در اتانول 70٪ خیس شده ، سپس الکل با تبخیر آزاد برداشته می شود. سپس بسته بندی باز می شود ، گردن از قوطی های فلزی یا شیشه ای شلیک می شود و جرم (حجم) محصول به مقدار لازم برای تهیه یک یا چند نمونه گرفته می شود.
5.3 بسته بندی نمونه (کیسه های فویل ، مواد پلیمری یا کاغذ) ، در محلی که قبلاً با سواب خیس شده در الکل درمان شده بود ، باز می شود. باز کردن بسته با نمونه ای از محصول به گونه ای انجام می شود که امکان آلودگی محصول و اشیاء اطراف آن وجود ندارد.
سطح مواد غذایی کنسرو شده در ظاهر طبیعی با یکی از روش های زیر با الکل اتیل درمان می شود:
سطح درب با یک سواب الکلی پاک می شود ، تامپون روی سطح باقی مانده و قبل از باز کردن مواد غذایی کنسرو شده ، روی آتش قرار می گیرد.
درپوش های لاستیکی و درپوش های تاج ، بسته های پلاستیکی و پلاستیکی به همان روش درمان می شوند ، اما تامپون آتش نمی گیرد.
بسته به هدف تجزیه و تحلیل ، یک پوشش فلزی (انتهای) با پانچ 1-4 بار در مجاورت فوری یک تامپون سوزانده شده باز و یا سوراخ می شود. اندازه سوراخ (قطر یا طول) باید 1-3 سانتی متر باشد.
5.4 نمونه های منتخب از محصول بلافاصله در محیط مواد مغذی کاشته می شوند یا برای تهیه رقیق سازی به محلول پپتون نمکی منتقل می شوند.
قبل از باز کردن بطری ها یا لوله هایی که دارای کلاه های پیچ هستند ، درپوش یا بوش تحت درمان قرار گرفته نشده است. لبه های بطری یا غشای لوله در شعله مشعل سوخته می شوند. غشاها با یک اسکالپل استریل سوراخ شده اند.
قبل از باز کردن بطری ، بسته شده با یک تاج یا روکش فویل ، دیافراگم در شعله مشعل سوزانده می شود ، دریچه با یک کلید استریل برداشته می شود ، لبه های بطری دوباره در شعله مشعل سوخته می شوند.
هنگام باز کردن بطری ها با مهر و موم لاستیکی ، مهر و موم شده با اتانول بدون شلیک اولیه برداشته می شود و لبه های بطری با شعله مشعل شلیک می شوند.
5.5 ظاهرا مواد غذایی کنسرو معیوب در یک سینی فلزی قرار می گیرند. بلافاصله قبل از انتخاب نمونه محصول ، سطح درب (انتهای) به روشی که در بند 5.2 مشخص شده است درمان می شود ، اما اتانول مشتعل نمی شود. درب درمان شده (یا انتهای) با قیف فلزی استریل معکوس پوشانده شده است به گونه ای که قیف کاملاً سطح آن را بپوشاند. با دقت کلاه (انتهای) را از طریق سوراخ باریک قیف با پانچ استریل سوراخ کرده و سوراخ سوزن را تشکیل دهید.
به جای قیف فلزی ، کیسه پلاستیکی مجاز است. پس از پردازش درب (انتهای) ، مواد غذایی کنسرو شده در یک کیسه پلاستیکی که از قبل با الکل اتیل مالیده شده است قرار داده می شود تا ته بسته بسته سطح در معرض آن شود. بسته پایین محکم گره خورده است. به آرامی با فشار سبک پانچ ، سوراخ را به طور هم زمان در درب قوطی قلع و در یک کیسه پلاستیکی محکم به آن فشار دهید.
پس از آنکه گاز و محصول دیگر با محصول خارج نشده ، قیف و کیسه برداشته می شود ، دوباره درب آن با سواب استریل پاک می شود ، سوراخ با پانچ باز می شود و نمونه ای از محصول بلافاصله از قوطی برای کاشت یا آماده سازی رقیق کننده های آن گرفته می شود.
6. غربالگری و تهیه رقت اولیه
6.1- از هر نمونه محصول بسته به شاخص های تعیین شده ، یک یا چند وزن برای تهیه رقیق سازی و / یا بذر در محیط کشت تهیه می شود.
6.2 حجم (حجم) نمونه در نظر گرفته شده برای تلقیح در محیط کشت و / یا برای تهیه رقت آن باید در مستندات هنجاری و فنی برای نوع خاصی از محصول یا روشهای تجزیه و تحلیل مشخص شود. اما حداقل 0.1 g 10 گرم (سانتی متر 3) باشد.
6.3 نمونه کاشت با وزن یا روش حجمی بلافاصله پس از باز کردن نمونه محصول گرفته می شود. کالبد شکافی در شرایطی انجام می شود که آلودگی محصول با میکروارگانیسم ها را از هم جدا می کند ، در مجاورت آن شعله سوزان با ابزارهای استریل.
6.4 نمونه ای از محصول گرفته شده است به گونه ای که تمام اجزای آن در آن با همان نسبت موجود در نمونه تحلیل شده ارائه می شوند.
6.5 برای تهیه رقیق کردن نمونه ای از محصول ، از محلول پپتون نمکی استفاده می شود. نسبت بین جرم (حجم) یک نمونه از محصول با میزان محلول پپتون-نمکی برای رقیق شدن اولیه و متعاقب آن است:
1: 9 - برای رقت 10 برابر (برای محصولاتی که حاوی مقدار زیادی چربی بدون مواد فعال کننده 1:10) باشد.
1: 5 - برای رقت 6 برابر؛
1: 3 - برای رقت 4 برابر؛
1: 1 - برای رقت 2 برابر.
در صورت نیاز به رقیق کردن نمونه ای از محصولات حاوی مقدار زیادی چربی ، مجاز به استفاده از سورفاکتانت ها (بی کربنات سدیم و غیره) هستند که فعالیت ضد میکروبی ندارند.
برای تهیه رقیق نمونه ای از محصولات با فشار اسمزی بالا ، پپتون یا آب مقطر مجاز است.
6.6. رقت اولیه یک نمونه از محصول مطابق با شرایط آسپتیک به یکی از روشهای زیر تهیه شده است:
انحلال محصولات؛
رقیق محصولات دارای فاز مایع.
تعلیق پودرها ، محصولات خمیری و قطعات سطحی از محصول آلوده به میکروبها. همگن سازی محصولات جامد.
6.7 نمونه هایی از محصولات مایع و چسبناک با پیپت استریل پنبه ای استریل با وارد کردن پیپت در عمق محصول گرفته می شوند.
بخشی از محصول باقی مانده بر روی سطح پیپت اجازه تخلیه تا نوک پیپت را دارد. قطره حاصل با لمس دیواره داخلی ظروف یا بسته بندی مصرف کننده در بالای سطح محصول برداشته می شود.
محصولات چسبناک با یک سواب استریل از سطح پیپت جدا می شوند.
بخشی از محصول برای تهیه رقت اولیه به ظرفی با محلول پپتون نمک منتقل می شود تا پیپت سطح محلول پپتون-نمکی را لمس نکند. یک پیپت استریل دیگر با پر کردن ده برابر و فشار دادن مخلوط ، محصول را با محلول پپتون نمکی مخلوط می کند.
هنگام کار با محصولات چسبناک ، برای مخلوط کردن سریعتر با محلول نمکی پپتون ، بهتر است چندین گلدان شیشه ای را درون ظرف ها مخلوط کنید.
6.8 محصول مایع ، که از دی اکسید کربن اشباع شده است (CO 2) ، به یک مخروط مخروط استریل منتقل شده ، بسته شده با یک پنبه پنبه ، یا داخل ظروف دیگر بسته می شود و با هم زدن مکرر در یک حرکت دایره ای در یک حمام آب در حمام آب با دمای 30 تا 37 درجه سانتیگراد گرم می شود. حباب های گاز ایستاده نیستند.
نمونه ای از نمونه محصول طبق صفحه 6.7 تهیه و پردازش می شود.
6.9 نمونه ای از محصولات پودری یا فله ای با یک قاشق استریل یا اسپاتولا از نقاط مختلف محصول گرفته می شود (در صورت لزوم 2 سانتی متر از لایه بالای محصول قبل از برداشت نمونه با یک قاشق استریل برداشته می شود) ، سپس نمونه به یک ظرف استریل از پیش وزن شده با درب ، وزن داده می شود. محلول پپتون نمکی به مقدار لازم برای تهیه رقت اولیه به نمونه اضافه می شود. این مخلوط 25 بار در یک حرکت دایره ای با شعاع 30 سانتی متر هم زده می شود یا می لرزد تا یک استحکام یکنواخت از محصول بدست آید.
اگر محصول پودری در آب حل نشود ، پس از مخلوط کردن آن با محلول پپتون نمکی ، سیستم تعلیق بدست آمده را به مدت 10 دقیقه می گذاریم و دوباره به مدت 1 دقیقه دوباره به شدت تکان می دهیم.
6.10 بخشی از نمونه های محصولات قابل باد در آب گرفته شده و رقت اولیه مطابق با الزامات اسناد اصولی و فنی برای نوع خاصی از محصول تهیه می شود.
6.11. بخشی از نمونه های محصولات محلول در آب جامد پس از سنگ زنی ، آسیاب یا خرد کردن در شرایط آسپتیک با یک قاشق یا قاشق گرفته می شود و طبق بند 6.9 پردازش می شود.
نمونه ای از محصولات جامد غیر محلول در آب در مواردی که در مستندات هنجاری و فنی مشخص شده است ، یکدست می شود. در حین همگن سازی محصول ، تعداد کل انقلاب های هموژنایزر باید 15-20 هزار نفر باشد تعداد تعداد هموژنایزر نباید کمتر از 8000 و بیش از 45000 چرخش در دقیقه باشد.
مجاز به همگن کردن یک محصول استریل شده با آسیاب کردن آن است تا زمانی که یک سازگاری همگن در ملات استریل با رعایت شرایط آسپتیک حاصل شود.
6.12. نمونه ای از محصولات خمیر پس از مخلوط شدن کامل با قاشق یا میله شیشه ای گرفته می شود و مطابق با 6.9 پردازش می شود.
6.13. نمونه ای از چربی های مایع با یک پیپت گرم که با شعله ور شدن گرم می شود گرفته می شود. پس از پر کردن پیپت با محصول ، باقیمانده مواد باقیمانده از سطح پیپت جدا می شوند.
محصول پیپت با یک درپوش شیشه ای زیر زمینی داخل ظروف آورده می شود و با مقدار لازم از محلول نمکی پپتون ، با حرارت 40-40 درجه سانتیگراد رقیق می شود. در صورت شناسایی میکروارگانیسم های روانگردان ، دما نباید از 37 درجه سانتیگراد تجاوز کند. چربی باقیمانده چسبیده به پیپت با محلول پپتون نمکی شستشو می شود که چندین بار مکیده شده و از پیپت آزاد می شود.
6.14. نمونه ای از چربی های جامد پس از برش محصول با چاقو یا سیم به قسمت های مختلف گرفته می شود. در صورت لزوم ، لایه بالایی را بردارید.
نمونه ای از محصول از سطح برش ها از نقاط مختلف با پوست سر گرفته می شود و با یک درب به یک ظرف وزن دار منتقل می شود.
یک توده مشخص از نمونه به یک بشقاب گردن با درپوش شیشه ای زمین منتقل می شود. چربی باقیمانده چسبیده به دیواره های ظروف در همان ظرف ها با مقدار مشخصی از محلول پپتون نمکی گرم شده 40-45 درجه سانتیگراد شسته می شود که در مقدار لازم برای بدست آوردن رقت اولیه به ظروف اضافه می شود.
از نظر حجم می توان نمونه ای از چربی های جامد گرفت. چربی ها در یک ظرف گردنی در حمام آب با دمای بیش از 45 درجه سانتیگراد ذوب می شوند. در شناسایی میکروارگانیسم های روانگردان دما نباید در حدود C از 37 تجاوز کند.
پس از مخلوط کردن چربی های ذوب شده ، آن را با یک پیپت گرم به ظرفی پهن و با درب شیشه ای زمین که حاوی مقدار لازم محلول پپتون-شور برای تهیه رقت اولیه است منتقل می کنیم. محلول پپتون نمکی تا 40-45 درجه سانتیگراد گرم می شود. در شناسایی میکروارگانیسم های روانگردان تا 37 درجه سانتیگراد
6.15. نمونه هایی از محصولات شلاق یا قوام بی نظیری که حاوی مقادیر زیادی چربی هستند ، پس از هم زدن با میله شیشه ای ، با یک قاشق در یک ظرف توزین گرفته می شوند و محلول پپتون نمکی گرم شده در دمای 40 تا 40 درجه سانتیگراد به مقدار لازم برای تهیه رقت اولیه اضافه می شود.
6.16. تعیین آلودگی میکروبی سطح نمونه های محصول با آبکش کردن با سواب پنبه ای انجام می شود.
یک پنبه استریل استریل با محلول پپتون نمک مرطوب شده و در نقاط مختلف روی سطح قطعات مختلف محصول مورد تجزیه و تحلیل با مساحت 100 سانتی متر مربع مالش داده می شود.
مساحت مورد تجزیه و تحلیل با استفاده از قالب های استریل با سوراخ هایی در اندازه مناسب اندازه گیری می شود.
تامپون در یک ظرف حاوی حداقل 100 سانتی متر 3 محلول پپتون-شور قرار می گیرد. ظروف با یک درپوش لاستیکی بسته می شوند و تا زمانی که تامپون ها به الیاف جدا شوند ، تکان می خورند. سیستم تعلیق حاصل رقت اولیه در نظر گرفته شده است.
7. تهیه رقیق ده برابر
7.1 اولین رقیق ده برابر نمونه اصلی است ، رقت اولیه مطابق بند 6 تهیه می شود. از آن رقیق های بعدی دریافت می شود.
7.2 رقت دوم بعدی از یک سهم رقت اصلی و نه سهم محلول پپتون نمکی با مخلوط کردن در شرایط آزمایشگاهی تهیه می شود.
اگر از پیپت برای مخلوط کردن رقت اولیه استفاده شده باشد ، سپس 1 سانتی متر 3 رقت اولیه در 9 سانتی متر 3 محلول پپتون نمکی با همان پیپت بدون لمس سطح محلول با پیپت اضافه می شود. رقت با ده بار مکش با پیپت دیگر مخلوط می شود و محتویات لوله از آن دمیده می شود.
7.3 رقت های سوم و بعدی به روش مشابه تهیه می شوند.
7.4 فاصله بین تهیه وزن محصول ، رقیق سازی آنها و کاشت بذر در محیط کشت نباید بیش از 30 دقیقه باشد.
